Современная диагностика сифилиса и оценка результатов. Серологическая диагностика сифилиса: Медицинский блог врача скорой помощи

Если сифилис не лечить, у больного через несколько лет начинают разрушаться внутренние органы. Человек может страдать десятилетиями, а смерть будет болезненной. Анализ на сифилис позволяет вовремя диагностировать заболевание и назначить лечение, прежде всего – антибиотикотерапию. Сколько времени уйдет на лечение, зависит от стадии заболевания и правильно назначенного лечения: на начальном этапе от болезни можно избавиться за три-четыре месяца. Самостоятельно сифилис не лечится.

Возбудителем сифилиса является бактерия, которая называется Бледная трепонема (Treponema pallidum). Она способна проникнуть в организм даже через незначительные повреждения, и хоть передается в основном половым путем, человек может заразиться и через предметы обихода. Правда, следует знать, что бактерия погибает через полчаса при температуре выше 48 градусов. Вот почему важна стерилизация.

Выделяют первичную, вторичную, латентную и третичную стадии сифилиса. Первые признаки недуга – это язва на коже, которая исчезает примерно через 5 недель . Спустя два месяца появляются признаки вторичного сифилиса в форме сыпи, язв и узелков. Одним из тяжёлых осложнений этой формы является поражение почек. Это состояние сопровождается протеинурией – повышенным содержанием белка в тесте мочи (выше 2-3 г/л). Обычно сыпь проходит через несколько недель без лечения.

Если болезнь не лечить, развивается третичный сифилис. Он проявляется через пять лет, когда происходит разрушение внутренних органов. Поражается нервная, сердечно-сосудистая системы, спинной и головной мозг. Выходят из строя почки, печень, желудок, кишечник.

Особенно опасна ситуация, если человек болен ВИЧ. Как и сифилис, ВИЧ наиболее часто передается половым путем и трудно лечится. При этом больные сифилисом подвергаются опасности подхватить ВИЧ, а больные ВИЧ рискуют заболеть сифилисом. Если сифилис подхватил ВИЧ-инфицированный, эффективность лечения зависит от стадии заболевания: чем дольше человек болен ВИЧ, тем больше риск развития тяжёлых осложнений сифилиса (особенно, если ВИЧ-инфицированный не лечится).

Как берут анализ

Если говорить о том, откуда забирают кровь на сифилис, то ответ таков: как и для определения ВИЧ, материал берется из вены. Иногда врач может назначить взять образец из пальца, но только при проведении неспецифических быстрых тестов. Связано это с тем, что многие нормы разработаны для венозной крови: в крови, взятой из пальца, показатели иные. Кроме того, из пальца материала на изучение можно получить меньше, чем из вены. Если же надо взять образец для анализа на сифилис из пальца, применяется та же лабораторная техника, как и для общего анализа крови.

Если исследование крови из пальца показало вероятность наличия бледой трепонемы, необходимо провести более развернутое, расширенное исследование. Кровь на сифилис в этом случае берут только из вены: лишь в этом случае можно получить правильный отрицательный или положительный результат.

Такая разновидность анализа, как мазок, в случае с сифилисом, как и с ВИЧ, неэффективна. В мазке возбудитель болезни отсутствует на всех стадиях заболевания.

Виды исследования

Для определения антител к бледной трепонеме в крови применяются следующие тесты:

• РИФ или FTA (реакция иммунофлюоресценции) – определяется реакция поглощения флюоресцирующих антител.
• РПГА или TPHA (реакция пассивной гемагглютинации) – анализ на сифилис, выявляющий антитела IgM и IgG.
• ИФА или ELISA – название расшифровывается как иммуноферментный анализ, определяет количественное содержание антител IgG и IgM.

Сифилис позволяют обнаружить трепонемные и нетрепонемные анализы. Первый тест на сифилис обнаруживает в крови антитела против антигенов к Treponema pallidum. Второй выявляет антитела против тканей, что разрушила бактерия.

ИФА является эффективным тестовым методом, который делается не только, чтобы определить наличие инфекции, но и определить стадию болезни. Кроме того, ИФА способен дать ответ на вопрос, болел ли данный человек когда-нибудь сифилисом. Чувствительность ИФА может достигать 90%.

Анализ ИФА позволяет определить антитела к Бледной трепонеме: иммуноглобулины – G, M, A. Их концентрация позволяет проследить процесс заболевания в его динамике.

Сразу после инфицирования иммунитет для борьбы с бактерией вырабатывают антитела IgA, через две недели – IgM. Через месяц появляются IgG . Когда начинают проявляться клинические симптомы недуга, кровь на сифилис показывает достаточное количество антител всех трех видов.

Исследования показывают, что специфические к сифилису антитела IgM резко уменьшаются после эффективного лечения. Особенность антител IgG состоит в том, что тест на сифилис выявляет их даже через большое время после излечения и на протяжении всей жизни пациента. Поэтому положительный результат ИФА не всегда значит наличие возбудителя сифилиса. Положительный тест может определить как стадию развития заболевания, так и то, что недавно было проведено эффективное лечение, а потому антитела еще циркулируют в крови. Отрицательный результат ИФА может означать как отсутствие заболевания, так и его раннюю стадию.

Реакция пассивной гемагглютинации

РПГА относится к специфическим трепонемным методам выявления возбудителя бледной трепонемы. При проведении анализа РПГА во время реакции антител и эритроцитов происходит слипание последних и выпадение их в осадок. Сколько осаждённых эритроцитов образуется при РПГА, прямо пропорционально к количеству антител трепонемы.

Чувствительность РПГА намного эффективнее во вторичном и третичном периоде сифилиса – 99%, тогда как в первичном достоверность анализа составляет 85%.

Специфичность РПГА позволяет его использовать для подтверждения диагноза других тестов, таких, как RPR или МРП. В тоже время РПГА не является настолько чувствительным к стадиям сифилиса, так как ИФА. Поэтому РПГА и ИФА надо рассматривать в комплексе друг с другом. Ложный, положительный результат РПГА возможен в 2,5 % случаев. Это возможно из-за сходства иммуноглобулинов с другими антителами, что выделяются при некоторых других заболеваниях, например, аутоиммунных.

Реакция Вассермана

Комплекс серологических реакций (КСР), один из которых известен как реакция Вассермана, является ценным диагностическим методом. Он позволяет как выявить инфекцию, так и определить стадию заболевания. Анализ крови на сифилис КСР в обязательном порядке должен быть дополнен трепонемно-специфическими методами анализа (РИБД и ИФА). Для проведения теста КСР используют антигены, извлеченные из сердечной мышцы крупного рогатого скота, которые по своим свойствам схожи с антигенами бледной трепонемы.

КСР не является специфичным анализом для сифилиса: положительный КСР возможен у больных туберкулёзом, малярией, при аутоиммунных заболеваниях, онкологии, во время беременности и других состояний. Анализ на сифилис при беременности сдавать обязательно, поскольку наличие этого заболевания у беременной может привести к выкидышу или рождению ребенка с врождённым недугом.

Экспресс-метод являет собой ускоренный вариант реакции Вассермана. При проведении экспресс-теста на сифилис также используют кардиолипидный антиген, который смешивают с сывороткой в выемке специальной стеклянной пластины.

Сколько времени уходит на выполнение теста, часто зависит от техники проведения. Обычно время выполнения экспресс-метода составляет около получаса.

Результат реакции экспресс-метода оценивается так же, как и КСР, положительными числами, от 0 до +4. Чувствительность экспресс-метода хоть и превосходит КСР, может выдать ложный положительный результат из-за другой болезни.

ОРС и УМСС являются ещё одним вариантом реакции Вассермана или экспресс метода. Расшифровка аббревиатуры УМСС обозначает ускоренный метод на скрытый сифилис. ОРС расшифровывается как отборочная реакция на сифилис. При проведении ОРС используются те же реактивы, что и при реакции Вассермана.

Как оценить результат

Чтобы получить точные данные, кровь на сифилис надо сдавать натощак. Понятие, натощак означает, что между приёмами пищи должно пройти не менее восьми часов. Если пациент пришёл сдавать анализ натощак, но последний раз принимал пищу меньше, чем за восемь часов, ему необходимо подождать. Понятие натощак также значит, что нельзя употреблять перед анализом любые напитки, кроме негазированной воды. Анализы сдают натощак не только для диагностики сифилиса: это общее правило.

Отрицательный анализ на сифилис обозначается знаком «-». Но отрицательный результат не всегда означает, что возбудителя болезни в организме нет. Чаще ложный отрицательный результат бывает при расшифровке быстрых тестов, основанных на реакции Вассермана. Поэтому расслабиться можно лишь тогда, когда данные всех анализов дадут отрицательный результат.

Самым высоким рейтингом доверия среди больных сифилисом является результат ПЦР . Если ПЦР положительный, это значит, что он действительно положительный. Если расшифровка отрицательна, то – отрицательный. Но ПЦР способен показать положительный результат и после успешного лечения, поскольку способен определить наличие как живой, так и мертвой бактерии. Ложный результат после успешного лечения могут выдать и другие тесты.

Анонимность лечения

Люди, особенно мужчины, нечасто выражают желание регулярно обследоваться у врача. Что касается сифилиса, то причиной этого может быть, как не проявляющие себя симптомы вялотекущего заболевания, так и стыд, нежелание, чтобы окружающие узнали о болезни.

Поэтому очень многие часто соглашаются пройти анонимное обследование, при этом хотят получить гарантию, что лечение также будет действительно анонимным. Конечно же, анонимно сдать анализ на сифилис проблем нет. Они возникают, когда больной хочет анонимно лечиться. Дело в том, что человек является носителем опасной венерической болезни и может заразить как близких ему людей, так и постороннего человека. Поэтому медлить ни в коем случае нельзя и во время лечения обязательно выполнять все указания врача.

Серологические исследования крови имеют исключительно важное значение. В настоящее время применяется комплекс, серологических реакций - обычно ставят классическую реакцию Вассермана и две осадочные реакции. Из осадочных реакций чаще применяют реакции Кана, Закс-Витебского и цитохолевую.

Результаты серологических исследований обозначаются плюсами следующим образом: + + + + резко положительная, + + + положительная, + + и + слабо положительная; отрицательную реакцию обозначают минусом (-).

Кроме указанного комплекса серологических реакций, в последние годы получила широкое признание реакция иммобилизации бледных трепонем (тест Нельсона - Майера), которая проводится со специфическим антигеном (взвесь бледных трепонем). Эта реакция более специфична, чем упомянутый комплекс реакций, которые проводятся с неспецифическими антигенами. Особую ценность тест Нельсона - Майера имеет при решении вопроса о специфичности положительной реакции Вассермана и осадочных реакций у лиц, не имеющих симптомов сифилиса.

Серологические реакции в различные периоды сифилиса . Диагностическая ценность серологических реакций в различные периоды сифилиса не одинакова. В первичном периоде - в течение 2-3 недель после возникновения первичной сифиломы - серологические реакции, как правило, отрицательны; начиная с 3-4-й недели они у некоторых больных становятся положительными. По мере приближения болезни к вторичному периоду процент положительных серологических реакций нарастает, а ко времени появления вторичных симптомов сифилиса они становятся положительными почти у 100% больных.

В свежем вторичном и рецидивном периодах болезни серологические реакции в крови остаются положительными почти у 100% больных.

В третичном периоде сифилиса с активными проявлениями болезни серологические реакции нередко, примерно у 15% больных, могут быть отрицательными, а при отсутствии активных явлений болезни число отрицательных реакций может достигать 30-40%.

Серологические реакции как критерий успешного лечения сифилиса . Специфическое лечение сифилиса необходимо проводить под контролем серологических реакций. Обычно у больных первичным серопозитивными и вторичным свежим периодом серологические реакции через 1-2 месяца рационального лечения сифилиса становятся отрицательными; во вторичном рецидивном периоде они могут стать отрицательными в этот же срок или несколько позже. Если же в указанные сроки серологические реакции не становятся отрицательными, то это свидетельствует о недостаточной эффективности лечения. В таких случаях необходимо усилить эффективность терапии, но не путем увеличения дозировки препаратов, а изменив методику лечения и присоединив методы неспецифической терапии.

Резко положительные серологические реакции при отсутствии клинических симптомов можно рассматривать как симптом сифилиса при условии, что они остаются резко положительными при повторном исследовании и что исследование производилось в квалифицированной серологической лаборатории.

Слабо положительные серологические реакции при отсутствии клинических симптомов и других данных не могут служить опорой для диагноза сифилиса; такие результаты следует принимать во внимание лишь в тех случаях, когда в прошлом у больного был сифилис и он подвергался соответствующему лечению. Слабо положительные серологические реакции могут иметь также значение при наличии у больного какого-либо заболевания неизвестной этиологии. В этих случаях результаты серологических реакций надо оценивать с учетом других анамнестических, клинических и лабораторных данных.

Неспецифические серологические реакции могут наблюдаться при многих заболеваниях. Так, резко положительный результат нередко бывает при проказе и возвратном тифе . При малярии , туберкулезе , бруцеллезе и многих других инфекционных заболеваниях, а также у больных злокачественными опухолями результаты обычно слабо положительны или положительны (+ + +) и редко бывают резко положительными (+ + + +).

Употребление перед исследованием алкогольных напитков или жирной пищи может обусловить неспецифическую слабо положительную реакцию. Кровь для серологических исследований следует брать натощак.

При отсутствии серологической лаборатории кровь для исследования рекомендуется пересылать почтой в конверте в виде «сухой капли».

Для получения сухой капли набирают в пробирку 5 мл крови из локтевой вены. Пробирку с кровью оставляют на 2 часа при комнатной температуре. Образовавшийся кровяной сгусток отделяют от стенок пробирки прокаленной и остуженной проволокой, затем кровь помещают в прохладное место до следующего утра. На следующий день градуированной пипеткой набирают 0,75 мл сыворотки, которую наносят на вощеную бумагу или полоску целлофана. Сыворотку на бумаге или целлофане оставляют до следующего дня при комнатной температуре, защитив ее от пыли и мух. После этого вощеную бумагу или целлофан с высушенной сывороткой свертывают в виде аптечного порошка, вкладывают в конверт и вместе с сопроводительной запиской отсылают почтой в ближайшую серологическую лабораторию.

Следует отметить, что метод серологических реакций с помощью «сухой капли» крови является менее надежным, чем обычный.

Для выполнения комплекса серологических реакций требуется высококвалифицированный персонал лабораторий, соответствую­щее лабораторное оборудование и значительное количество ингре­диентов. Многочисленность серологических реакций объясняется тем, что доказана антигенная мозаичность бледных трепонем, а в связи с этим и наличие в сыворотке крови больного сифилисом соответ­ствующей множественности антител (реагины, комплементсвязывающие и полисахаридные антитела, агглютинины, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию, и др.). В каждой стадии сифилиса преобладают те или иные антитела и, сле­довательно, реакции с одними антителами могут быть уже положи­тельными, а с другими - еще отрицательными. Кроме того, отно­сительная специфичность стандартных серореакций побуждает в це­лях избежания диагностических ошибок пользоваться не одной из этих реакций, а их комплексом. Несмотря на такой комплексный подход при серологическом обследовании пациента, следует помнить, что в ряде случаев даже весь комплекс может давать ложноположительный, неспецифический, результат. Ложноположительные серо­логические реакции в крови наблюдаются при малярии, сыпном и возвратном тифе, лепре, бруцеллезе, пневмонии, скарлатине, при злокачественных новообразованиях, во время менструаций, за 2 нед до родов и в течение 3 нед после родов, после приема алкоголя, жирной пищи, некоторых лекарственных препаратов, при хрони­ческих гнойных процессах, болезнях печени и др. Установлено, что с увеличением возраста пациентов возрастает количество неспеци­фических ложноположительных результатов стандартных серореак­ций. Все это заставляет весьма осторожно относиться к показателям серологического обследования пациентов и считать серореакций цен­ной, но вспомогательной методикой, подтверждающей данные кли­нической картины, результаты других лабораторных исследований (на бледную трепонему, спинномозговой жидкости), результаты конфронтации.

Реакция Вассермана (РВ) отличается сложностью постановки. Ее производят в специальных серологических лабораториях специалис­ты-серологи. Она основана на феномене связывания комплемента. В постановке реакции используют как специфические антигены из бледных трепонем, так и неспецифические антигены (экстракты из органов здоровых животных, например, мышцы бычьего сердца). Связывание комплемента производится комплексом (липоидный ан­тиген и реагин испытуемой сыворотки). Для индикации образовав­шегося комплекса применяют гемолитическую систему (эритроциты барана и гемолитическая сыворотка). При постановке РВ с кардиолипиновым антигеном ее чувствительность возрастает. Также бо­лее чувствительной оказалась модификация РВ на холоде (реакция Колмера). Особенностью реакции Колмера является двухфазность температурных режимов (первая фаза - при температуре 18 .20 °С в течение 30 мин, вторая - в холодильнике при температуре +4 .+6°С в течение 16-20 ч), при которых протекает связывание комплемента. Реакция Колмера улавливает реагины в тех сыворотках, где в силу их небольшой концентрации РВ, поставленная по обычной методи­ке, дает отрицательный результат. Однако, по мнению большинства сифилидологов, реакция Колмера и РВ с кардиолипиновым антиге­ном при своей высокой чувствительности уступает в своей специ­фичности другим модификациям РВ.

В случае получения резко положительных результатов реакций Вассермана и Колмера их ставят с уменьшающимися дозами испы­туемой сыворотки для определения титра реагинов (количественная методика Боаса). Количественное определение реагинов помогает отдифференцировать ранний и поздний скрытый сифилис, а также позволяет легче оценивать эффективность противосифилитической терапии: снижение титра реагинов свидетельствует об эффективно­сти лечения.

Осадочные реакции (Кана и цитохолевая Закса-Витебского) мно­го проще по технике выполнения по сравнению с РВ. Для их поста­новки используют более концентрированные антигены, которые содержат большое количество холестерина. При их постановке вы­падает осадок, хорошо видимый невооруженным глазом (иногда для оценки результатов пользуются лупой или агглютининоскопом).

Степень позитивности РВ, реакции Колмера и осадочных реак­ций обозначается числом плюсов или крестами: 4+ (резко положи­тельная), 3+ (положительная), 2+ или 1+ (слабоположительная), ± (сомнительная), - (отрицательная). При постановке количествен­ной реакции Вассермана или Колмера указывается то разведение сыворотки, при котором еще получается резко положительный ре­зультат (например, 1:5, 1:10, 1:20 и т.д.). Реакция Кана, согласно многочисленным данным, дает совпадающие результаты с реакци­ей Вассермана в 93-96 % наблюдений (ее неспецифические резуль­таты регистрируются в 1,6%), а реакция Закса-Витебского - в 95-99 % (ее неспецифические результаты регистрируются в 1,3 % на­блюдений).

В связи с большим объемом профилактических обследований и сложностью выполнения КСР в настоящее время широко применяется экспресс-метод серодиагностики сифилиса, когда не требуется брать кровь из вены. Любой лаборант, берущий кровь для клини­ческого анализа, возьмет кровь и для ускоренного исследования на сифилис. Дополнительно ему нужно лишь использовать отдельный капилляр для определения СОЭ, и провести регистрацию результа­тов этой микрореакции.

Ускоренный метод серодиагностики сифилиса. (Приводится на основании методического письма, составленного мик­робиологическим отделом ЦНИКВИ. Авторы Н.М. Овчинников и Т.И. Милонова.)

Методика постановки микрореакции. Кровь берут из кончика пальца, так же, как и для исследования СОЭ; необходимо только, чтобы лаборант для исследования на сифилис взял на один капил­ляр больше, соответственно увеличив и количество цитрата натрия. Для этого, смочив капиллярные пипетки Панченкова, набирают 5 % раствор цитрата натрия до метки 75 и выливают в пробирку. Затем набирают три капилляра крови и вносят их в ту же пробир­ку, перемешивают. В один капилляр набирают кровь для СОЭ, а оставшуюся в пробирке кровь в конце приема оставляют стоять в течение 1 ч при комнатной температуре, после чего проводят иссле­дование.

Оборудование: капиллярные пипетки Панченкова (количество их зависит от объема работы), пластинки из органического стекла с лунками и плоским дном диаметром 1 см, пастеровские пипетки, пробирки длиной 8-10 см и диаметром 1-1,2 см, перья Дженнера.

Ингредиенты: кардиолипиновый антиген для микрореакции, на­трия хлорид (химически чистый), холина хлорид, натрия цитрат, мертиолат (не обязателен; нужен только, если антиген хранится более 5 дней).

Растворы: 0,85 % изотонический раствор натрия хлорида; 10 % раствор холина хлорида, разведенный изотоническим раствором на­трия хлорида (при приготовлении раствора следует помнить, что холин гигроскопичен, поэтому необходимо растворить весь поро­шок сразу после того, как будет вскрыт флакон с препаратом). Если раствор приготовлен с добавлением 0,01 % раствора мертиолата, он может храниться в течение года; 5 % раствор натрия цитрата.

Приготовление эмульсии кардиолипинового антигена.

Чтобы врачу поставить точный диагноз на сифилис, нужна дополнительная и точная информация, поэтому пациента направляют на обследование, состоящее из нескольких видов анализов .

Одним из самых распространенных способов обнаружения трепонем - это исследование в темном поле микроскопа. Благодаря такому методу, специалист может видеть «живой» микроорганизм в действии. Можно отслеживать и движения бледной трепонемы, а также видеть все особенности её строения. Чтобы начать такой анализ, необходимо добыть материал, который можно взять с поверхности шанкра или очагов эрозии.

Благодаря кср на сифилис, эффективность лечения значительно возрастает, есть возможность ставить прогнозы на дальнейший исход заболевания. С помощью реакции на сифилис устанавливается полная программа терапии и контроль над состоянием больного пациента. Уровень пораженности серологических реакций обозначают крестиком и различаются так:

• - отрицательная;
• 1+ - слабоположительная;
• 2+ - слабоположительная;
• 3+ - положительная;
• 4+ - резко положительная.

Кср на сифилис используется для диагностики всех форм этого венерического заболевания, в обследовании пациентов, имевшие незащищенный секс с инфицированным человеком, людям, подозревающихся на наличие бледных трепонем, а также беременным женщинам - для исключения наличия бледной трепонемы в организме.

В случае положительной Кср реакции на сифилис в результате проведённого анализа, для полной картины врач венеролог назначает ряд дополнительных анализов, и только после получения и рассмотрения результатов, ставит диагноз и определяет эффективную программу лечения. На сегодняшний день, медицина предоставляет возможность провести следующие дополнительные тесты:

• РВ (реакция Вассермана). Часто может давать ложноположительный результат.
• РИФ (реакция иммунофлюоресценции или метод Кунса). Имеется три метода: прямой, непрямой и с комплементом. Реакция Кунса помогает выявить антигены микробов или обнаружить наличие антител.

Благодаря проведению кср и дополнительных исследований, ошибки в диагностировании быть не должно. А значит, врач венеролог сможет расписать продуктивную программу лечения, прогнозировать течение заболевания и его излечимость. Ведь, чем раньше вы начнёте лечение, тем больше вероятности того, что эта болезнь не принесёт вам непоправимого вреда для всего организма. Сифилис - опасная и заразная болезнь, не лечение которой неминуемо приводит к смерти.

Сифилис – это опасное венерическое заболевание, которое вызвано бледной трепонемой, передается половым путем и способно поражать все органы и системы организма. В настоящее время при своевременной диагностике и проведенной терапии стало возможным полное излечение сифилиса.

Диагностирование этого недуга основывается на лабораторных и клинических данных.

Виды серологических реакций на сифилис

Среди лабораторных исследований особенно ценится серологический анализ, который требуется не только для диагностирования недуга, но и для изучения общей картины влияния лечебных мер на болезнь, изучение эффективности терапии.

Серологическая реакция на сифилис стала отдельной отраслью медицины. Стоит заметить, что созданы различные типы такой диагностики, которые во многих странах официально признаны. При этом необходимо, чтобы врач имел достаточную квалификацию в области серологии, которая потребуется для правильного истолкования результатов.

На пространстве нашей страны для серологического исследования сифилиса применяют следующую инструкцию (утверждена в 1995 году):

1. КСР (комплекс серологических реакций). В этот список входит реакция связывания трепонемные, кардиолипиновые антигены с комплементами. Также микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном;

2. Трепонемные реакции. В их составе используются реакции бледных трепонем, и реакция иммунофлюоресценции.

Этот небольшой список мер, которые обязательны для серологического анализа сифилиса имеют различную «чувствительность», специфичность, и рекомендуются строго по отношению к каждому, отдельно взятому случаю и поставленной задачи. Теперь давайте подробнее.

Микрореакция преципитации. Особенности и результаты

Применяется при массовом обследовании населения на сифилис. Существуют разновидности – микрореакция на стеле, экспресс – метод диагностики сифилиса, для чего используется как сыворотка крови обследуемых, так и плазма. Эта реакция возникает при контакте со специфическим кардиолипиновым антигеном.

Как правило, результат проведенного анализа оценивается качественно - 4+, 3+,2+, отрицательный. В свою очередь, экспресс-метод позволяет получить результат уже через полчаса, и для исследования потребуется всего лишь несколько каплей плазмы крови, что берут с пальца пациентов.

Таким же способом обследуются те лица, которые поставлены на учет в венерологическом отделении. Если применять такую методику анализа локально, изолировано, то она представляет собой лишь отборочный тест.

На основании экспресс - теста нельзя точно сказать, что пациент больной сифилисом, но при положительном результате – врач может написать направление к дерматовенерологу. Этот специалист проведет дальнейшее обследование с помощью других методик – РИФ, УСР, РИБТ. Стоит также заметить, что экспресс-анализ не проверяют у беременных женщин, доноров, так как в большинстве случаев получается ошибочный, положительный результат. Зачастую экспресс – тест могут проводить медработники, прошедшие специальную подготовку, но изучение анализа и определение результатов обязаны лаборанты.

Реакция связывания комплимента или РСК

Реакция с кардиолипиновыми и трепонемными антигенами требуется для подтверждения первоначального диагноза (если экспресс-тест и МП показали положительный результат). Правда, такую процедуру рекомендуют применять, если имеются активные проявления, или же обследуемые лица были в половом контакте с зараженным сифилисом. Кроме того, подлежат диагностированию на РСК люди, у которых подозревается скрытый (латентный) сифилис. Естественно, реакцию на связывание комплимента назначают и для того, чтобы определить эффективность терапии.

Для обследования необходимо 5-7 миллилитров крови из локтевой вены. У грудничков кровь на анализ выбирают из височной вены, или из надреза на пятке.

Забор крови у пациента необходимо делать на «голодный желудок». Далее врач оставляет образец в сухой, чистой пробирке на 2-3 часа при комнатной температуре (это необходимо для свертывания). Постановку комплекса серологических реакций производят в специально подготовленных лабораториях.

Принцип действия описываемой реакции объясняется тем, что реагины, обнаруженные в сыворотке крови предположительно больных сифилисом, умеют вступать в реакцию с различными антигенами. Образовавшиеся комплексы классифицируют введенное в реакцию вещество. Для индексирования КСР используется гемолитическая система (т.е. применяется смешение эритроцитов барана с гемолитической сывороткой).

Если случился КСР, то эритроциты выпадают в осадок, и такой процесс заметно невооруженным глазом. Выраженность реакции определяется врачом по такой классификации:

• 4+ Резко положительный.
• 3+ Положительный.
• 2+, 1+. Слабоположительный.
• Отрицательный.

Следует заметить, что кроме качественной оценки применяют количественную. Такая система оценивания требуется для того, чтобы определить стадию развития сифилиса, и эффективность проводимой терапии.

Впервые такой принцип исследования использовали в 1906 году Нейссер, Брук и Вассерман. В «роли» антигена они применили водный экстракт печени. В последующем времени, такую реакцию стали подставлять и под другие антигены, что сделало её еще более чувствительной. В настоящее время для постановки реакции советуют применять такие антигены:

• Кордилипиловый антиген (экстракт из сердца быка с избыточным количеством лецитина и холестерина).
• Трепонемный антиген (взвесь из апатогеннных культуральных трепонем, которая была обработана ультразвуковым излучением).

Реакция связывания этих антигенов достигает положительного результата через две – четыре недели с момента применения, и постепенно увеличивается, достигая максимума в титре, что наблюдается при появлении вторичного свежего сифилиса. Затем, титр специфических веществ постепенно снижается, и при рецидивной форме сифилиса, как правило, не превышает отметки в 1:180 – 1:120. Среди страдающих третичным проявлением сифилиса описанная реакция положительна в 70 процентах случаев.

Важно подметить, что комплекс серологических реакций не является исключительным показателем сифилиса в организме человека, и может дать неспецифические (ложноположительные) результаты. Правда, такое возникает, если специалист допустил ошибку в обследовании – некачественная процедура забора крови, грязные пробирки, низкая квалификация и пр.

Кроме того, ложноположительный результат чаще всего получают пациенты, страдающие лепрой, малярией, ситуационными недугами. Также получить ошибочный диагноз могут люди с туберкулезом, заболеваниями печени, а также те, которые принимают медикаменты. У женщин ложноположительный диагноз можно поставить, если пациентка беременна, или у неё критические дни.

• У младенцев на десятом дне жизни;
• При лихорадочных явлениях в течение двух недель после родов;
• Если у пациента есть свежие травмы, было хирургическое вмешательство, вакцинация.

А все потому, что физико-химические реакции в сыворотке крови при таких явлениях могут также показать ложноположительный результат на сифилис.

Реакция РИФ

Для того чтобы отличить ложноположительный от истинного результатов обследования КСР, в нашей стране применяет специфические серологические реакции, такие как РИФ и РИБТ. Также такой метод исследования рекомендован для диагностики формы заболевания, и при подозрении на сифилитическую инфекцию.

Для проведения данной процедуры потребуется количество крови в объеме 5-10 мл, которую также можно брать из локтевой вены на «голодный желудок». Полученную кровь вливают в сухую пробирку, оставляют на некоторое время в комнате для свертывания, а позже – отправляют в обследование в специальную лабораторию, которая имеется в кожно-венерологических отделениях.

Основа реакции РИФ – это непрямо метод определения флюоресцирующих антител. Антигеном для связывания в данном случае служит взвесь обработанных ультразвуковым излучением бледных трепонем. Таким образом, вещество фиксируют на предметных стеклах, куда также выставляют вещество крови пациента вместе с антивидовой флюоресцирующей сывороткой. Для определения результата потребуется люминесцентный микроскоп, с помощью которого специалист оценит степень свечения трепонем. Считается, что при положительном результате трепонемы имеют желто-зеленый оттенок свечения, и «мощность» этого процесса оценивается плюсами (от одного до четырех). Отрицательный результат – трепонемы не светятся.

Реакция РИБТ

Другая реакция, которая помогает диагностировать сифилис – это РИБТ, которая была впервые применена в 1949 году Нельсоном и Мейером. Её основа – феномен обездвиженных, бледных трепонем антигеном из сыворотки крови больного, в которой присутствует комплемент.

В качестве антигена для реакции применяется живые, бледные трепонемы, которые получены из крови зараженных сифилисом кроликов. Подсчет утративших подвижность трепонем проводиться под микроскопом. Результат реакции оценивается в процентах, где:

• Отрицательный – 0-20%
• Сомнительный – 21-31%
• Слабоположительный – 31-50%
• Положительный – 51-100%.

Реакция может показать положительный результат в конце первичной стадии сифилиса, и в большинстве случаев итог не меняется на протяжении всех этапов болезни. Иногда РИБТ положительна даже при полном выздоровлении. При третичном сифилисе, поражениях внутренних органов, врожденном сифилисе, когда КСР неточно показывает результаты, эта реакция дает истинные результаты в 98-100% случаев. К слову, чтобы диагностировать латентную, скрытую форму сифилиса обязательно требуется диагностика на РИБТ.

РИБТ может показать ложноположительный результат, если в исследованной крови есть элементы трепонемоционных веществ – антибиотиков, которые приводят к неспецифическому обездвиживанию живых бледных трепонем. Поэтому, брать кровь у пациента, которому предписали приём антибиотиков советуют не раньше, чем через две недели после окончания антибактериальной терапии.

Анализ спинномозговой жидкости

Часто, серологическое обследование применяют и для того, чтобы точно узнать степень поражения нервной системы сифилисом. Для этого применяют анализ на основе спинномозговой жидкости пациента. Также это исследование поможет определить белок, ферментные элементы, что свидетельствует о развитии патологии, и «облегчит» врачу уточнение диагноза. Как вы уже догадались, забор спинномозговой жидкости проводят не из пальца, а при помощи люмбальной пункции. Эта процедура требует от врача осторожности, следования всем нормативам и технике безопасности, чтобы не усугубить положение больного. Как правило, такое обследование назначается в случае подозрения любой формы сифилиса центральной нервной системы.