Препараты предназначены для серологической идентификации бактерий рода Salmonella в реакции агглютинации на стекле. Препараты представляют собой иммунные адсорбированные сыворотки кроликов, содержащие агглютинины к О-антигенам и Н-антигенам сальмонелл. Препараты выпускают в виде моновалентных и поливалентных О- и Н-сывороток.
Поливалентные сыворотки основных групп (A, B, C, D, E) содержат О-антитела против антигенов 1; 2; 3; 4; 5; 6 1 ; 6 2 ; 7; 8; 9; 10; 12; Vi; редких групп (F, G, H, J, I, K, L, M, N, O, P, Q, R, S, T, U, W, X, Y, Z, 52, 53, 54, 55, 57, 58, 59, 60, 61) содержат О-антитела против антигенов: 11; 13, 22; 14, 24; 16; 17; 18; 21; 23; 24; 25; 28; 30; 35; 38; 39; 40; 41; 42; 43; 44; 45; 47; 48; 50; 52; 53; 54; 55; 57; 58; 59; 60; 61.
Поливалентные Н-сыворотки содержат Н-антитела против родственных антигенных комплексов: gm, gp, gq, gpu, fg, fgs, gst, gt, mt, gmt, gms; Z4 4 Z 24 ; Z4 4 Z 32 ; I-1,2; 1,5; 1,6; 1,7.
Титр специфических антител в О- и Н-сыворотках и поливалентных Н не ниже 1:80, а поливалентных О – 1:40.
Получают так же, как и другие диагностические сыворотки. Применяют для серотипирования сальмонелл в реакции агглютинации.
Сальмонеллезные О- и Н-монодиагностикумы. Представляют собой взвеси сальмонелл, убитых нагреванием (О-диагностику-мы) или обработкой формалином (Н-диагностикумы). Применяют для серодиагностики брюшного тифа в реакции Видаля.
Типовые сальмонеллезные бактериофаги. Применяют для фа-готипирования сальмонелл.
Брюшнотифозная моновакцинд и брюшнотифозная спиртовая вакцина, обогащенная Vi-антигеном. Применяют для специфической активной профилактики брюшного тифа.
Поливалентный брюшнотифозный бактериофаг. Выпускается в виде таблеток с кислотоустойчивым покрытием. Применяют для экстренной профилактики брюшного тифа.
Коли-бактерин. Содержит лиофильно высушенные живые клетки E.coli штамма М17, обладающего выраженными антагонистическими свойствами в отношении ряда патогенных кишечных бактерий. Применяют для нормализации кишечной микрофлоры при дисбактериозе и лечении дизентерии, главным образом у детей.
Бифидумбактерин. Содержит лиофильно высушенную взвесь живых клеток B.bifidum. Применяют для лечения хронических кишечных инфекций невыясненной этиологии у детей и дизентерии.
Бификол. Содержит смесь высушенных живых бактерий E.coli штамма М17 и B.bifidum. Показания к применению те же.
Лактобактерин. Содержит продукты жизнедеятельности лак-тобактерий. Выпускается в таблетированном виде. Применяют для лечения дисбактериозов у детей.
Антибиотики: сульфаниламиды, полусинтетические пени-циллины, цефалоспорины 2-4-го поколения, хлорамфеникол, тетрациклины, фторхинолоны, полимиксин.
Тема 13.3. ВОЗБУДИТЕЛИ ПИЩЕВЫХ
ТОКСИКОИНФЕКЦИЙ, ИНТОКСИКАЦИЙ, ХОЛЕРЫ
И ДРУГИХ БАКТЕРИАЛЬНЫХ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ
План
А Программа
1. Биологические свойства возбудителей холеры, пищевых токсикоинфекций и интоксикаций. Их патоген-ность, экология, особенности инфекции и эпидемиология вызываемых заболеваний.
2. Лабораторная диагностика.
3. Диагностические, профилактические и лечебные препараты.
Демонстрация
1. Мазки из чистых культур возбудителей пищевых интоксикаций кишечных инфекций: Staphylococcus aureus, Clostridium perfringens, Vibrio cholerae. Окраска по методу Грама.
2. Диагностические и лечебно-профилактические препараты.
Задание студентам
1. Микроскопировать и зарисовать мазки из чистых культур возбудителей кишечных инфекций.
2. Бактериологическая диагностика холеры.
2.1. Указать материал для исследования.
2.2. Идентификация чистой культуры вибрионов, выделенных от больного:
1) изучить морфологические и тинкториальные свойства: микроскопировать мазок из чистой культуры, выделенной от больного;
2) изучить антигенные свойства: отметить результаты развернутой реакции агглютинации с диагностической 01-сывороткой;
3) изучить биохимические свойства: отметить результат гексаминового теста;
4) определить чувствительность выделенной культуры к диагностическим бактериофагам;
5) отметить способность к росту на среде с поли-миксином;
6) дать заключение.
3. Диагностика ботулизма:
1) указать материал для исследования;
2) проанализировать результаты РИГА для обнаружения ботулотоксина в сыворотке крови больного (реакция Бойдена). Дать заключение.
4. Ознакомиться с диагностическими и лечебно-профи
лактическими препаратами.
Методические указания
■ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПИЩЕВЫХ ТОКСИКОИНФЕКЦИЙ БАКТЕРИАЛЬНОЙ ПРИРОДЫ
Микробиологическая диагностика пищевых токсикоинфекций, вызванных Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp.
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: фекалии, рвотные массы, промывные воды желудка больного, остатки пищевых продуктов - возможные источники и факторы передачи инфекции.
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:
Производят путем посева
Материала на дифференциально-диагностические и элективные среды (Эндо, висмут-сульфит агар и др.) для выделения чистой культуры сальмонелл и эшерихий, а также в конденсационную воду в пробирке со скошенным питательным агаром для выявления бактерий рода Proteus. После инкубации посевов при 37 °С в течение 20-24 ч отмечают цвет колоний на чашках с дифференциальной средой и наличие "ползучего" роста, характерного для Proteus spp., в пробирке со скошенным питательным агаром. Подозрительные колонии пересевают на скошенный питательный агар для получения чистых культур и одновременно ставят с ними ориентировочную реакцию агглютинации на стекле, используя смеси диагностических сывороток. На следующий день с чистой культурой ставят развернутую реакцию агглютинации с соответствующей монорецеп-торной сывороткой и делают посев на среды "пестрого" ряда. При выделении одного и того же серовара сальмонелл или эшерихий из организма больных людей и пищевого продукта делают окончательное заключение об этиологии пищевой ток-сикоинфекции - источнике заболевания. При наличии "ползучего" роста на скошенном питательном агаре из конденсационной воды петлей берут материал для приготовления препарата "висячая" капля с целью установления подвижности и для мазка, который окрашивают по методу Грама и микроско-пируют. Затем выделяют чистую культуру, определяют биохимические и другие признаки и устанавливают вид: P.vulgaris, P.mirabilis, P.morganii и P.rettgeri.
Оценка роли условно-патогенных микроорганизмов в этиологии пищевых токсикоинфекций должна быть строго аргументирована: а) бактериологическим, серологическим, эпидемиологическим и клиническим исключением сальмонеллезов, дизентерии, холеры; б) выделением идентичных штаммов условно-патогенных бактерий из рвотных масс, промывных вод желудка, испражнений, продуктов.
■ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПИЩЕВЫХ ИНТОКСИКАЦИЙ БАКТЕРИАЛЬНОЙ ПРИРОДЫ
Микробиологическая диагностика стафилококковых пищевых интоксикаций
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: рвотные массы, промывные воды желудка, подозрительные пищевые продукты.
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:
Экспресс-методы диагностики: иммунохимические, биохимические и молекулярно-биологические исследования. Иммунохимические исследования. Диагностика основана на обнаружении энтеротоксина в исследуемом материале. Энтеро-токсин Staphylococcus spp. экстрагируют изотоническим раство-
ром хлорида натрия, затем определяют его присутствие и серологическую специфичность реакцией преципитации в геле с иммунными антитоксическими сыворотками А, В, С. Техника постановки реакции описана выше (см. рис. 10.1.6). Используют также латекс-агглютинацию, ИФА, РИА и др.
Бактериологическое исследование. С целью выделения чистой культуры стафилококка исследуемый материал, который может содержать жизнеспособные бактерии, засевают в чашки с ЖСА. Полученные по схеме (см. тему 12.1) чистые культуры проверяют на способность продуцировать энтеротоксины. Для эпидемиологического анализа массовых стафилококковых интоксикаций проводят фаготипирование выделенных культур с помощью набора стафилококковых фагов.
Биопроба. Для обнаружения энтеротоксина можно использовать биопробу - скормить изучаемый материал котятам-сосункам, у которых стафилококковый энтеротоксин вызывает рвоту и понос через 30-60 мин после скармливания.
Похожая информация.
Монорецепторная сыворотка агглютинирующая сальмонеллезная (Н)
Определение серовара Диагн. Ат получают в 2 этапа. На 1-м этапе берут S.paratyphi (чистую культуру микроба) . А О-1,2,12 на обработку формалином. Происходит разрушение О-Аг, второй этап гипериммунизация кролика оставшимся Аг и вырабатывается Ат. . Полученная сыворотка используется для сероидентификации сальмонел в РА на 3 этапе бакт. анализа.
Сухая агглютинирующая адсорбированная поливалентная сыворотка к шигеллам.
Сибиреязвенная сыворотка лошадиная, меченная ФИТЦ
АТ,диагностический;Получают гипериммунизацией лошадей возбудителем сибирской язвы, применяют в РИФ (прямой метод)
Кроличий античеловеческий глобулин, меченный ФИТЦ
АТ,диагностический. Получают гипериммунизацией кролика гамма-глобулинами человека, применяют в РИФ (непрямой метод)
Гриппозная диагностическая сыворотка
Диагн. Ат,которая используется в РТГА или РСК для идентификации вируса гриппа опр.серотипа, при вирусологическом методе диагностики. При образовании пуговки серотип сыворотки соответствует серотипу вируса гриппа. При образовании зонтика НЕ соответствует.
Диагностикумы, антигены
Туляремийный диагностикум
Бруцеллезный диагностикум
Препарат подкрашен синькой или негциан-виолетом. Используется для РА на стекле в реакции Хаддилсона для серодиагностики бруцеллеза. Ели аглютинация происходит мгновенно, то человек болен бруцеллезом (титр АТ 1:200). Если раекция произошла через 30 сек. И позже,то надо повторить,титр 1:100, если агл-и нет, то человек здоров!
Парагриппозный диагностикум
Эритроцитарный туберкулезный диагностикум для РНГА.
Гонококковый антиген
Представляет собой диагностический препарат полученный из гонококков Neisseria gonorrhaea, путем инактивирования нагревание. Используется для серодиагностики гонореи в РСК.
Кардиолипиновый антиген
Ультраозвученный трепонемный антиген
Кардиолипиновый антиген для реакции микропреципитации (микрореакции)
Бактериофаги диагностические
Холерный монофаг Эль-Тор
АГ диагностический. Представляет собой фаголизат суточной бульонной культуры возбудит. Холеры биовара «Эль-Тор».
Фаголизат получается путем добавления нескольких капель бактериофага опред.типа в суточную бульонную культуру возбудителей холеры. После инкубации в следствии размножения б/ф, возбудитель холеры разрушается,а фаговые частицы накапливаются. Всё это фильтруется сквозь бакт.фильтры. Полученный б/ф титруют по методу Грациа и разливают в ампулы. Монофаг «Эль-Тор» используется для фаготипирования холеры при бактериологич.анализе методом Отто.
Аллергены
Тулярин
Бруцеллин
Туберкулин очищенный (PPD)
АГ,диагностическийю Получают: выращивают микобактерии, выделяют белки, применяют для внутрикожной аллергической пробы Манту; учитывают через 48-72 часа, измеряют диаметр папулы в мм (допустимые 5-22 мм), больше реакция положительная!
Стафилококковый анатоксин
Лечебнай препарат, получают из экзотоксинов бактериальной клетки, по правилу Рамона (3-х «4»). Для этого токсины бактерий культивируют в исслед. пит. Среде и пропускают сквозь бактериальный фильтр. Вводят обычно под кожу или внутримышечно. Приобретённый, активный, искусственный, антитоксический иммунитет. Применяется для хронических форм инфекий!
Дифтерийный анатоксин
Лечебно-профилактический препарат, полученный из экзотоксинов дифтерии по правилу Рамона. Используют для лечения легких форм дифтерии и для профилактики лиц, находящихся в контакте с больными дифтерией.
Входит в состав вакцин АКДС, АДС. Приобретённый, активный, искусственный, антитоксический, напряженный иммунитет.
Столбнячный анатоксин
Профилактический препарат, получаемый из экзотоксина столбняка по правилу Рамона. Используется в составе АКДС, АДС, а также для профилактики столбняка людям с порезами (ножевой) гвоздевой, при ожогах, обморожении, а так же роженицам и их детям,в случае родов не в стационаре. Приобретённый, активный, искусственный, антитоксический, ненапряженный иммунитет.
Холероген-анатоксин
(+ О1-антиген)
Комбинированная вакцина, содержит извлеченный химическим путем О1-АГ возбудитель холеры и инактивируется температурой, а так же холероген-анатоксин получают по принципу Рамона, из холерного экзотоксина. Применяется по эпид. Показаниям у взрослух и детей после 7 лет. Иммунитет приобретенный, искуственный,активный.
tyle="fM? sz?E? ?? font-family:"Times New Roman","serif""> , штамм Ту-2, из которой химическим путем выделили Аг-Vi и инактивировали, т.о. вакцина содержит 2 поверхностных исходных Аг. Применяется по эпид. показаниям. С 2-х летнего возраста: Приобретённый, активный, искусственный, антимикробный, напряженный иммунитет. RV каждые 5 лет.
Сибиреязвенная вакцина
Вакцина БЦЖ.
В 1921 году Аг. Представляет собой профилактический препарат, содерж. Живые ослабленные туберкулезные палочки бычьего типа (Mycobacterium bocsis). Ослабление путем культивирования в течении 13 лет, 230 пассажей на картофельно-глицериновую среду солей жирных кислот.
При получении вакцины легли 2 принципа: 1) Дженер использовал возбудителя родственного патогенному, но не опасного для человека. 2) Пастер (аттенуация) –снижение вирулентности. Вакцина является обязательной, вводится всем детям в род.доме на 4-6 день жизни, внутрикожно в область плеча! RV через 7 лет, или в 14, при отрицательной пробе Манту!!! Приобретённый, активный, искусственный, антимикробный, напряженный иммунитет.
Коколюшная моновакцина
Коревая вакцина
Гриппозные вакцины
Инфлювак-субъединичная вакцина, Аг, профилактический препарат. Получен путем выращивания вируса гриппа и выделение отдельных компанентов из бактерии. Применяется для профилактики гриппа по эпид.показаниям! Приобретённый, активный, искусственный, антивирусный, напряженный иммунитет.
Чумная вакцина
Профил.вакцина, содержит живые авирулентные штаммы чумной бактерии, выделяют из трупа погибшего человека (мужчины). Исп.по эпид.показаниям в очагах чумы, лицам выезжающим в эпид.территории, мед.персоналу работающем в очагах. Вводят подкожно в область плеча, RV ежегодно. Приобретённый, активный, искусственный, антимикробный, ненапряженный иммунитет.
Антирабическая вакцина
культурально-клеточная. Лечебно-профилактическая вакцина содержит вирус бешенства, выращенная в культуре диплоидных клеток, кл.легких человека или фибробластах новорожденных хомечков и инактивируют формалином. Вводят по 2-м схемам: 1) Люди в группе риска 1V из 7 дней и из 28 дней. 2) экстренная профилактика по эпид.показаниям (после укуса животного)
Бруцеллезная вакцина
Вакцина против гепатита В (Engerix-B)
Аг, профилактическая, ген, который осущ.синтез оболочки вируса, присоединяется к геному дрожжевой клетки. Применяется детям в первые 12 часов жизни. Сроки вакцинации: 0-1-6 мес, сроки риска: 0-1-2-12 мес.
Энжерикс В-генно-инженерная вакцина. Иммунитет: Приобретённый, активный, искусственный, антивирусный, напряженный.
Гонококковая вакцина
Дизентериная вакцина
Бруцеллезная вакцина
Стафилококковая вакцина
Лечебно-профилактические сыворотки, пробиотики, бактериофаги
Интерферон лейкоцитарный
Интерфероны- низкомолекулярные белки глобулиновой природы, синтезируется клетками и ответ на проникновение вируса, оказывают противовирусное, антипролиферативное, иммуномодулирующее действие. Лечебно-профилактический. Получают из лейкоцитов, для лечения и профилактики вирусных инфекций.
Бифидумбактерин
Лактобактерин
Колибактерин
Бификол
В живом состоянии! Для лечения и профилактики дизбиоза. Пробиотики- бактерии из нормальной кишечной флоры.
Монокомпонентные: бифидумбактерин, лактобактерин
Поликомпонентные: бификол- АГ, выращивают в одном реакторе бифибобактерии, в другом колибактерии; смешивают, затем замораживают, высушивают.
Дизентирийный бактериофаг
Брюшнотифозный бактериофаг
Брюшнотифозный (Эль-тор) Получают из фильтрата фаголизата холерных вибрионов. Могут быть как в житком виде, так и в таблетках для лечения.
Монорецепторная сыворотка агглютинирующая сальмонеллезная (О)
Пренадлежность к группе диагност. Ат, кот. получают в 3 этапа: на 1-ом выбираем сальмонелу (например S.typhimurium c Аг структурой О-1,4,5,12; Mi 1,2) нагревают на водяной бане для разрушения жгутиков Н-Аг,ост. Только О-Аг 1,4,5,12. На втором этапе проводят гипериммунизацию кроликов оставшимся О-Аг сальмонелл, у кролика образуются О-1,4,5,12 Ат. Это поливалентная сыворотка. На 3-ем этапе проводим истощение сыворотки по Кастеллани. Для этого и получают сыворотку добавляют предварительно нагретых на вод. Бане из той же сер.группы например S.hudelberg o-4,5,12 Аг, произойдет связь Аг и оставшегося О-1 Ат. Полученная сыворотка используется для сероидентификации сальмонел в РА на 3 этапе бакт. анализа.
Препарат диагностический. Содержит антитела. Представляет сыворотку крови животных, иммунизированных убитой культурой сальмонелл. Предназначены для серологической идентификации бактерий рода Salmonella в реакции агглютинации на стекле. монорецепторная сыворотка агглютинирующая сальмонеллезная (О) Пренадлежность к группе
Диагност. Ат, кот. получают в 3 этапа: на 1-ом выбираем сальмонелу (например S.typhimurium c Аг структурой О-1,4,5,12; Mi 1,2) нагревают на водяной бане для разрушения жгутиков Н-Аг,ост. Только О-Аг 1,4,5,12. На втором этапе проводят гипериммунизацию кроликов оставшимся О-Аг сальмонелл, у кролика образуются О-1,4,5,12 Ат. Это поливалентная сыворотка. На 3-ем этапе проводим истощение сыворотки по Кастеллани. Для этого и получают сыворотку добавляют предварительно нагретых на вод. Бане из той же сер.группы например S.hudelberg o-45,12 Аг, произойдет связь Аг и оставшегося О-1 Ат. Полученная сыворотка используется для сероидентификации сальмонел в РА на 3 этапе бакт. анализа.
47Агглютинирующая адсорбированная поливалентная сыворотка к Shigella flexneri I-V.
48Агглютинирующая адсорбированная сальмонеллёзная О-сыворотка рецептор 9.
Препарат диагностический. Содержит антитела. Представляет сыворотку крови животных, иммунизированных убитой культурой сальмонелл. Получен по методу Кастеллани. Предназначены для серологической идентификации бактерий рода Salmonella в реакции агглютинации на стекле.
50. Агглютинирующая адсорбированная поливалентная сальмонеллёзная О-сыворотка (групп А, В, С, Д, Е).
Препарат диагностический. Содержит антитела к О-антигену. Представляет сыворотку крови животных, иммунизированных убитой культурой сальмонелл. Получен по методу Кастеллани. Предназначены для серологической идентификации бактерий рода Salmonella в реакции агглютинации на стекле.
51 Агглютинирующая адсорбированная сальмонеллёзная Н-сыворотка рецептор d
Препарат диагностический. Содержит антитела к Н-антигену рецептору d. Представляет сыворотку крови кроликов, иммунизированных убитой культурой сальмонелл. Получен по методу Кастеллани. Предназначены для серологической идентификации бактерий рода Salmonella в реакции агглютинации на стекле.
50.Агглютинирующая адсорбированная поливалентная сыворотка к Shigella flexneri I-V.
Препарат диагностический. Содержит антитела. Представляют собой сыворотки кроликов, иммунизированных формалинизированными и живыми взвесями типичных по всем признакам шигелл. При взаимодействии с соответствующими микроорганизмами сыворотки вызывают их агглютинацию. Предназначены для серологической идентефикации Shigella flexneri I-V. Диагностические шигеллёзные сыворотки представляют собой лиофилизированные адсорбированные сыворотки кроликов, содержащие монорецепторные антитела к 38 наименованиям антигенов. К восьми группам антигенов выпускаются поливалентные сыворотки. Препараты предназначены для идентификации бактерий рода Shigella в реакции агглютинации. Диагностические шигеллёзные сыворотки имеют титр антител в реакции агглютинации не менее 1:40. С помощью данных сывороток можно определить любые бактерии рода Shigella согласно международной классификации. Препарат разлит в ампулы по 2мл. Выпускают в сухом виде. Срок годности монорецепторных сухих сывороток - 5 лет, поливалентных сухих – 3 года при хранении в сухом тёмном месте при температуре 4-80 С.