Выделение из ЛРС . Дубильные вещества – это смесь различных полифенолов, имеющих сложную структуру и очень лабильных, поэтому выделение и анализ отдельных компонентов дубильных веществ представляет большие трудности. Для получения суммы дубильных веществ ЛРС экстрагируют горячей водой, охлаждают, а затем экстракт обрабатывают последовательно:
Петролейным эфиром (очистка от хлорофилла, терпеноидов, липидов);
Диэтиловым эфиром, извлекающий катехины, оксикоричные кислоты и др фенолы
Этилацетатом, в который переходят лейкоантоцианидины, эфиры оксикоричной кислоты и др. Оставшееся водное извлечение с дубильными веществами и другими фенольными соединениями и фракциями 2 и 3 (диэтилового эфира и этилацетата) разделяют на индивидуальные компоненты с помлщью различных видов хроматографии. Используют:
а) адсорбционную хроматографию на колонках целлюлозы,
б) распределительную хроматографию на колонках селикагеля;
в) ионообменную хроматографию;
г) гель-фильтрацию на колонках сефадекса и др.
Идентификация индивидуальных дубильных веществ основана на сравнении Rf в хроматографических методах (на бумаге, в тонком слое сорбента), спектральных исследованиях, качественных реакциях и изучении продуктов расщепления (для гидролизуемых дубильных веществ).
Количественное определение дубильных веществ . можно разделить на гравиметрические, титриметрические и физико-химические.
Гравиметрические методы основаны на количественном осаждении дубильных веществ солями тяжелых металлов, желатиной или адсорбцией гольевым порошком. Весовой единый метод (ВЕМ) широко применяется в кожевенной промышленности. Метод основан на способности дубильных веществ образовывать прочные соединения с коллагеном кожи. Для этого полученное водное извлечение из ЛРС делят на две равные части. Одну часть выпаривают, высушивают и взвешивают. Вторую часть обрабатывают кожным (гольевым) порошком, фильтруют. Фильтрат выпаривают, высушивают и взвешивают. По разности сухих остатков 1 и 2 части (т.е. контроля и опыта) определяют содержание в растворе дубильных веществ.
Титриметрический метод , включенный в ГФ-ХI, именуемый как метод Левенталя-Нейбауэра, основан на окислении фенолных ОН-групп перманганатом калия (КMnO 4) в присутствии индигосульфокислоты, являющейся регулятором и индикатором реакции. После полного окисления дубильных веществ начинает окисляться индигосульфокислота до изатина, в результате чего окраска раствора из синей переходит в золотисто-желтую. Другой титриметрический метод определения дубильных веществ – метод осаждения таннина сульфатом цинка с последующим комплексонометрическим титрованием трилоном Б в присутствии ксиленового оранжевого используется для определения таннина в листьях сумаха дубильного и скумпии кожевенной.
Физико-химические методы определения дубильных веществ :
1) колориметрические – ДВ дают окрашенные соединения с фос-молиб или фос-вольфрам к-ми в присутствие Na 2 CO 3 или с реактивом Фолина-Дениса (на фенолы).
2) хромато-спектрофотометрические и нефелометрические методы, которые используют, главным образом, в научных исследованиях.
Распространение в растительном мире, условия образования и роль растениях . Низкое содержание дубильных веществ отмечено у злаков. У двудольных некоторые семейства, – например, розоцветные, гречишные, бобовые, ивовые, сумаховые, буковые, вересковые, – насчитывают многие роды и виды, где содержание таннидов доходит до 20-30% и более. Наивысшее содержание дубильных веществ найдено в патологических образованиях – галлах (до 60-80%). Древесные формы богаче дубильными веществами, чем травянистые. Дубильные вещества неравномерно распределены по органам и тканям растений. Они накапливаются, главным образом, в коре и древесине деревьев и кустарников, а также в подземных частях травянистых многолетников; зеленые части растений значительно беднее дубильными веществами.
Дубильные вещества аккумулируются в вакуолях, а при старении клеток адсорбируются на клеточных стенках. Чаще всего в растениях встречается смесь гидролизуемых и конденсированных дубильных веществ с преобладанием соединений той или иной группы.
С возрастом растений количество дубильных веществ в них уменьшается. Растущие на солнце растения накапливают больше дубильных веществ, чем растущие в тени. В тропических растениях образуется значительно больше дубильных веществ, чем в растениях умеренных широт.
Био-медицинское действие и применение дубильных веществ . Дубильные вещества и содержащие их ЛР применяют в основном в качестве вяжущих, противовоспалительных и кровоостанавливающих средств .
А. Преимущественно гидролизуемые:
RhizomataBistortae – корневища Змеевика .
Горец змеиный (змеиный корень , змеевик ) (Polygonumbistorta ) – сем. Гречишные, Polygonaceae
Химический состав ЛРС : 15-25% дубильных веществ, преимущественно гидрлизуемых, галловую, эллаговую, аскорбиновую, фенолкарбоновые и органические кислоты, флавоноиды (кверцетин)
Основное действие ЛРС : вяжущее, антисептическое.
Характер применения . Настой и отвар применяется как вяжущее, кровоостанавливающее, антивоспалительное при небольших кровотеченях в ЖКТ, остром и хроническом воспалениях желудка, пищевых отравлениях, дерматозах, ожогах, воспалении полости рта, влагалища, геморрое.
FoliaCotinuscoggygriae – листья Скумпии кожевенной .
Скумпия кожевенная (Cotinuscoggygria ) – сем. Сумаховые, Anacardiaceae – ветвистый кустарник
Химический состав ЛРС . 0,2% эфирного масла (преобладает мирцен), ~25% таннина, флавоноиды.
Основное действие ЛРС : вяжущее, дезинфицирующее.
Характер применения . используются для промышленного получения таннина и его препаратов, а также препарата Флакумин , представляющего собой сумму флавоноловых агликонов из листьев скумпии и обладает желчегонным действием.
FoliaRhuscoriariariae – листья Сумаха дубильного .
Сумах дубильный (Rhuscoriariariae ) – сем. Сумаховые, Anacardiaceae – кустарник
Химический состав ЛРС . дубильные вещества (25%, преобладает таннин), флавоноиды (2,5% − производные кверцитина, мирицетина, кемпферола), галловую и эллаговую кислоты.
Основное действие ЛРС : вяжущее, дезинфицирующее.
Характер применения . используются для промышленного получения таннина и его препаратов, используемых при лечении воспалительных процессов рото-носовой полости с помощью полосканий 2% водным или водно-глицериновым раствором, язв, ран и ожогов с помощью смазывания 3-10% растворами и мазями.
Rhizomata Bergeniaecrassifoliae – корневища Бадана толстолистного.
Бадан толстолистный (Bergeniacrassifolia ) – сем. Камнеломковые, Saxifragaceae – многолетнее травянистое растение
Химический состав ЛРС : дубильные вещества (~27%, из них танин – 8-10%), галловая кислота, арбутин (до 22%), свободный гидрохинон (2-4%), кумарины, смолы, витамин С, сахар,
Характер применения . Настой и отвар из корней и корневищ бадана применяют в гинекологии, стоматологии для остановки кровотечений и как антивоспалительное, антисептическое, для лечения гастритов и язв желудка и 12-перстной кишки, в народной медицине – для лечения туберкулеза легких.
RhizomataetradicesSanguisorbae – корневища и корни Кровохлебки .
Кровохлебка лекарственная (Sangusorbaofficinalis ) – сем. Розоцветные, Rosaceae – многолетнее травянистое растение
Химический состав ЛР : дубильные вещества, преимущественно гидролизуемые (12-20%), эллаговая, галловая кислоты, флавоноиды, антоцианы, катехины, сапонины.
Основное действие ЛРС : вяжущее, кровоостанавливающее.
Характер применения . Корневища и корни кровохлебки применяют в виде отвара и жидкого экстракта как вяжущее средство при желудочно-кишечных заболеваниях, энтероколите, поносе; как кровоостанавливающее при маточных и геморроидальных кровотечениях, кровохаркании.
FructusAlni – соплодия (шишки) Ольхи .
FoliaAlniincanae – листья Ольхи серой.
FoliaAlniglutinosa – листья Ольхи черной.
Ольха черная (клейкая ) (Alnusglutinosa ), о. серая (Alnusincana ) – сем. Березовые, Betulaceae – деревья или крупные кустарники.
Химический состав ЛРС : соплодия ольхи содержат дубильные вещества, галловая кислота (до 4%), флавоноиды. В листьях о. серой и о. черной содержатся флавоноиды.
Основное действие ЛРС : вяжущее, дезинфицирующее, антивоспалительное.
Характер применения . Отвар и настой применяют внутрь при острых и хронических энтеритах, колитах, дезинтерии; наружно – для полоскания горла, полости рта.
Б. Преимущественно конденсированные:
CorticesQuerqus –кора дуба.
Дуб обыкновенный (Querqusrobur ) – сем. Буковые, Fagaceae – мощное дерево
Химический состав ЛРС : дубильные вещества (10-20%, гидролизуемые и конденсированные), галловая, эллаговая кислоты, флавоноиды
Основное действие ЛРС : вяжущее, антибактериальное.
Характер применения . в виде отвара и настоя как наружное вяжущее и противововоспалительное средство для лечения стоматитов, гингивитов, воспалений ротовой полости, женских половых органов, ожогов кожи, потливости.
RhizomataTormentillae – корневища лапчатки прямостоячей .
Лапчатка прямостоячая – Potentillaerecta – сем. Розоцветные,Rosaceae – многолетнее травянистое растение
Химический состав ЛРС . дубильные вещества (15-30%: преобладают конденсированные таннины), антоцианы, катехины.
Основное действие ЛРС
Характер применения . Отвар и настой применяют внутрь как вяжущее и противовоспалительное средство при воспалительных состояниях рта и гортани, расстройствах ЖКТ, наружно при экземе.
Fructus Vaccinium mirtilli – плодычерники.
Cormi Vaccinii mytilli – побегичерники.
Черникаобыкновенная (Vaccinium myrtillus L.) –Вересковые, Ericaceae – мелкий кустарничек
Химический состав ЛРС . дубильные вещества (18-20%), в том числе конденсированные (5-12%), флавоноиды (гиперин, рутин), антоцианы.
Основное действие ЛРС : вяжущее, противовоспалительное.
Характер применения . чаще в виде настоя, отвара, киселя в связи с бродильными и гнилостными процессами в кишечнике, колитах. Показано, что плоды черники улучшают кровоснабжение глаз, стабилизируют структуру сетчатки, улучшают ночное зрение.
FructusPadi – плоды черемухи .
Черемуха обыкновенная (Padusavium ), ч. азиатская (P. asiatica ) – сем. Розоцветные,Rosaceae – дерево до 10 м высотой
Химический состав ЛРС : дубильные вещества (15%: преимущественно конденсированные), фенолкарбоновые и органические кислоты, витамин С, сахара, гликозиды терпеноидов
Основное действие ЛРС : вяжущее, дезинфицирующее.
Характер применения . Отвар и настой применяют как вяжущее средство и дезинфицирующее ЖКТ: при дизентерие, поносах. Плоды черемухи − компонет желудочных сборов.
Владельцы патента RU 2439568:
Изобретение относится к области фармакологии и может быть использовано для определения дубильных веществ в растительном сырье. Способ определения дубильных веществ в растительном сырье заключается в том, что навеску сырья экстрагируют водой при кипячении, охлаждают, фильтруют, измеряют оптическую плотность аликвотной пробы при длине волны 277 нм и рассчитывают содержание суммы всех дубильных веществ по определенной формуле, далее к аликвотной пробе фильтрата добавляют 1% раствор коллагена в 1% уксусной кислоте, взбалтывают, фильтруют, измеряют оптическую плотность фильтрата при длине волны 277 нм и рассчитывают содержание осаждаемых дубильных веществ по определенной формуле. Способ позволяет повысить точность определения содержания дубильных веществ в растительном сырье и селективно определить осаждаемые и не осаждаемые дубильные вещества в растительном сырье.
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, области фармакогнозии и фармацевтической химии и может быть использовано для контроля качества растительного сырья, содержащего дубильные вещества.
Известен способ определения дубильных веществ в лекарственном растительном сырье (ЛРС) методом кулонометрии в пересчете на таннин (С.Г.Абдуллина и др. Кулонометрическое определение дубильных веществ в лекарственном растительном сырье. // Фармация. №4. - 2010. - С.13-15).
Недостатком данного способа является использование дополнительного оборудования (кулонометра), специфичного титранта (гипойодид калия), который по окислительным свойствам приближается к перманганату калия и не дает возможность дифференцировано определить высоко- и низкомолекулярные дубильные вещества.
Известен также способ определения содержания таннина и производных галловой кислоты в чае методом кондуктометрии (Патент №2127878. Способ раздельного определения таннина и катехинов (в пересчете на галловую кислоту) в чае. М.: 1999 г.).
Недостатком данного способа является применение токсичных органических растворителей (изобутиловый спирт), а также использование цветной реакции с Fe (III), продуктом которой является нестабильное по окраске во времени окрашенное соединение.
Известен также способ количественного определения дубильных веществ в пересчете на таннин в листьях скумпии и сумаха методом комплексонометрии после осаждения дубильных веществ солями цинка (ГОСТ 4564-79. Лист скумпии. Технические условия; ГОСТ 4565-79. Лист сумаха. Технические условия).
Недостатком данного способа является длительность проведения анализа и трудность определения точки эквивалентности.
Известен также способ количественного определения дубильных веществ спектрофотометрическим методом после реакции с реактивом Фолина-Чокальтеу в пересчете на галловую кислоту (Руководство по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище. Руководство. Р 4.1.1672-03. - М. - 2004 г. - с.94-95).
Недостатком данного метода является невозможность раздельного определения низко- и высокомолекулярных дубильных веществ.
Наиболее близким к предлагаемому является способ, заключающийся в том, что дубильные вещества определяют методом спектрофотометрии в пересчете на галловую кислоту (Руководство по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище. Руководство. Р 4.1.1672-03. - М. - 2004 г. - С.120).
Недостатком данного способа является многократное разведение испытуемого образца, в результате которого концентрация дубильных веществ в растворе плохо определима. Также в этом способе раствором сравнения служит буферный раствор, что затрудняет проведение анализа. Кроме того, данный способ не дает возможность раздельно определить содержание низкомолекулярных и высокомолекулярных дубильных веществ.
Задачей изобретения является повышение точности определения дубильных веществ и возможность раздельного определение осаждаемых и не осаждаемых дубильных веществ в растительном сырье.
Поставленная задача решается тем, что навеску сырья экстрагируют водой при кипячении, охлаждают, фильтруют, измеряют оптическую плотность аликвотной пробы при длине волны 277 нм и рассчитывают содержание суммы всех дубильных веществ по формуле
50 - объем колбы, мл,
W - влажность сырья, %,
к аликвотной пробе фильтрата добавляют 1% раствор коллагена в 1% уксусной кислоте, взбалтывают, фильтруют, измеряют оптическую плотность фильтрата при длине волны 277 нм и рассчитывают содержание осаждаемых дубильных веществ по формуле
D 1 - оптическая плотность раствора 1,
D 2 - оптическая плотность раствора 2,
m нав - масса навески сырья, г,
V a - объем аликвотной пробы, мл,
250 - общий объем извлечения, мл,
50 - объем колбы, мл,
508 - удельный показатель поглощения галловой кислоты (оптическая плотность 1% раствора галловой кислоты 1 мг/мл),
W - влажность сырья, %.
Практически способ осуществляется следующим образом. Около 2,0 (точная навеска) измельченного сырья, просеянного сквозь сито с диаметром отверстий 3 мм, помещают в колбу вместимостью 500 мл, заливают 250 мл нагретой до кипения воды и кипятят 30 мин с обратным холодильником при периодическом помешивании. Охлаждают до комнатной температуры, доводят водой до 250 мл, процеживают через вату так, чтобы частицы сырья не попали в водное извлечение. Первые 50 мл фильтрата отбрасывают.
1-4 мл водного извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят водой до метки (раствор 1). Измеряют оптическую плотность раствора 1 при длине волны 277 нм. В качестве сравнения используют воду.
30 мл водного извлечения помещают в мерную емкость вместимостью 50 мл, добавляют 2-10 мл реактива осаждения, взбалтывают 30-60 мин, отстаивают, фильтруют. 1-4 мл полученного фильтрата переносят в колбу вместимостью 50 мл, доводят водой до метки (раствор 2). Измеряют оптическую плотность раствора 2 при длине волны 277 нм. В качестве сравнения используют воду.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Для анализа взято растительное сырье - кора дуба.
Около 2,0 (точная навеска) измельченного сырья коры дуба, просеянного сквозь сито с диаметром отверстий 3 мм, помещают в колбу вместимостью 500 мл, заливают 250 мл нагретой до кипения воды и кипятят 30 мин с обратным холодильником при периодическом помешивании. Охлаждают до комнатной температуры, доводят водой до 250 мл, процеживают через вату так, чтобы частицы сырья не попали в водное извлечение. Первые 50 мл фильтрата отбрасывают.
2 мл водного извлечения из коры дуба помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят водой до метки (раствор 1). Измеряют оптическую плотность раствора 1 при длине волны 277 нм. В качестве сравнения используют воду. D 1 для коры дуба равно 0,595.
30 мл водного извлечения помещают в мерную емкость вместимостью 50 мл, добавляют 2 мл реактива осаждения, взбалтывают 30 мин, отстаивают, фильтруют. 2 мл полученного фильтрата переносят в колбу вместимостью 50 мл, доводят водой до метки (раствор 2). Измеряют оптическую плотность раствора 2 при длине волны 277 нм. В качестве сравнения используют воду. D 2 для коры дуба равно 0,276.
Пример 2. Для анализа взято растительное сырье корневища змеевика.
Около 2,0 (точная навеска) измельченного сырья корневища змеевика, просеянного сквозь сито с диаметром отверстий 3 мм, помещают в колбу вместимостью 500 мл, заливают 250 мл нагретой до кипения воды и кипятят 30 мин с обратным холодильником при периодическом помешивании. Охлаждают до комнатной температуры, доводят водой до 250 мл, процеживают через вату так, чтобы частицы сырья не попали в водное извлечение. Первые 50 мл фильтрата отбрасывают.
1 мл водного извлечения из корневища змеевика помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят водой до метки (раствор 1). Измеряют оптическую плотность раствора 1 при длине волны 277 нм. В качестве сравнения используют воду.
30 мл водного извлечения помещают в мерную емкость вместимостью 50 мл, добавляют 7 мл реактива осаждения, взбалтывают 60 мин, отстаивают, фильтруют. 1 мл полученного фильтрата переносят в колбу вместимостью 50 мл, доводят водой до метки (раствор 2). Измеряют оптическую плотность раствора 2 при длине волны 277 нм. В качестве сравнения используют воду.
Предлагаемый способ позволяет повысить точность определения содержания дубильных веществ в растительном сырье и селективно определить осаждаемые и не осаждаемые дубильные вещества в растительном сырье.
Способ определения дубильных веществ в растительном сырье в пересчете на галловую кислоту, заключающийся в том, что навеску сырья экстрагируют водой при кипячении, охлаждают, фильтруют, измеряют оптическую плотность аликвотной пробы при длине волны 277 нм и рассчитывают содержание суммы всех дубильных веществ по формуле:
где x a - содержание суммы дубильных веществ в пересчете на галловую кислоту, %;
50 - объем колбы, мл;
508 - удельный показатель поглощения галловой кислоты (оптическая плотность 1% раствора галловой кислоты 1 мг/мл);
W - влажность сырья, %,
к аликвотной пробе фильтрата добавляют 1%-ный раствор коллагена в 1%-ной уксусной кислоте, взбалтывают, фильтруют, измеряют оптическую плотность фильтрата при длине волны 277 нм и рассчитывают содержание осаждаемых дубильных веществ по формуле:
где X - содержание осаждаемых дубильных веществ в пересчете на галловую кислоту, %;
D 1 - оптическая плотность раствора 1;
D 2 - оптическая плотность раствора 2;
m нав - масса навески сырья, г;
V a - объем аликвотной пробы, мл;
250 - общий объем извлечения, мл;
50 - объем колбы, мл;
508 - удельный показатель поглощения галловой кислоты (оптическая плотность 1%-ного раствора галловой кислоты 1 мг/мл);
W - влажность сырья, %.
Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к психоневрологии, и описывает способ прогнозирования восстановления неврологических функций у больных в остром периоде ишемического инсульта путем проведения клинических и биохимических исследований общей концентрации альбумина (ОКА) в сыворотке крови в г/л, где дополнительно на 5-7 день заболевания определяют эффективную концентрацию альбумина (ЭКА), рассчитывают резерв связывания альбумина (РСА) и при величине этого показателя менее единицы прогнозируют отрицательный результат восстановления неврологических функций у больных в остром периоде ишемического инсульта.
Изобретение относится к медицине, к биологическим исследованиям в онкологии, и может быть использовано для определения развития злокачественного процесса при опухолях головного мозга после оперативного лечения.
Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и описывает способ оценки эффективности неоадъювантной химиотерапии рака мочевого пузыря путем исследования пациента, при котором производят регистрацию максимальной интенсивности аутофлюоресценции опухолевых тканей в зеленой области спектра на этапе первичной диагностики и через 1 месяц после проведения предоперационной химиотерапии и при увеличении у пациента значений максимальной интенсивности аутофлюоресценции опухолевой ткани на 15% от исходных и более эффективность лечения оценивают как частичную регрессию опухолевого процесса, при отсутствии изменений показателей интенсивности аутофлюоресценции опухолевой ткани от исходных определяют стабилизацию процесса, при уменьшении показателей интенсивности аутофлюоресценции опухолевой ткани на 15% и более от исходных отмечают прогрессирование опухолевого процесса.
количественное определение дубильное вещество
Дубильные вещества -- группа весьма разнообразных и сложных по составу растворимых в воде органических веществ ароматического ряда, содержащих гидроксильные радикалы фенольного характера. Дубильные вещества широко распространены в растительном царстве, обладают характерным вяжущим вкусом. Они способны осаждаться из водного или водно-спиртового раствора раствором клея, а с солями окиси железа давать различных оттенков зелёные или синие окрашивания и осадки (чернильного свойства).
История изучения
Несмотря на то, что дубильные вещества стали известны уже давно (таннин был впервые получен Дейе и независимо Сегеном в 1797 г. и в руках Берцелиуса в 1815 г. имелся уже в довольно чистом состоянии) и много изучались, к началу XX века они были недостаточно исследованными, и не только химическая натура и строение почти всех их оставалось невыясненными, но даже и эмпирический состав очень многих из них разными исследователями делался различно. Объясняется это легко, с одной стороны, тем, что, будучи в большинстве веществами, не способными кристаллизоваться, они трудно получаются в чистом виде, а с другой -- малою их стойкостью и легкою изменяемостью. Глазивец (1867), как и многие другие, считал все Д. вещества за глюкозиды или тела, им подобные; однако позднейшие исследования показали, что таннин хотя, по-видимому, и встречается в соединении с глюкозой в альгаробиллах и мироболанах (Zollfel, 1891), но сам по себе не есть глюкозид (H. Schiff 1873), также и Д. кислоты дубовой коры (Etti 1880, 83, 89, Lowe 1881), равно как и очень многие др. Д. вещества, ничего общего с глюкозидами не имеют, а получение из некоторых из них сахаристых веществ обусловливалось исключительно нечистотою исследовавшихся препаратов. В настоящее время можно с достаточной уверенностью судить лишь о строении таннина, представляющего ангидрид галловой кислоты (см. и ниже). Собственно Д. вещества выделяются в особую группу органических соединений, обладающих некоторой совокупностью общих признаков, лишь благодаря именно неизвестности их строения. Весьма возможно, что по выяснении последнего они распределятся со временем по различным классам органических соединений, и тогда не представится более надобности и в особом общем названии для них, а нынешнее название "Дубильное вещество", согласно недавнему предложению Рейнитцера, придется, пожалуй, удержать только для тех из них, которые на самом деле способны дубить кожи.]. Деление их по окрашиванию, производимому с солями окиси железа, на железосинящие (Eisenblauende) и железозеленящие (Eisengrunende) ныне оставлено, потому что одно и то же Д. вещество может давать иногда синее, а иногда зелёное окрашивание, смотря по тому, какую взять соль железа, а сверх того, окрашивание может изменяться от прибавки, например, малого количества щелочи. Деление Д. веществ на физиологические (см. выше), дубящие кожу и вместе с тем дающие при сухой перегонке пирокатехин и не дающие галловой кислоты при кипячении с слабой серной кислотой, и патологические, для дубления менее пригодные (хотя и осаждающиеся раствором клея), при сухой перегонке дающие пирогаллол, а при кипячении со слабой серной кислотой -- галловую кислоту, также не вполне отвечает фактам, ибо, как в настоящее время известно, и патологические Д. вещества могут, хотя и не столь успешно, служить для дубления, а кроме того, таннин, например, являясь по преимуществу патологическим Д. веществом, встречается, по-видимому, и как нормальный продукт (сумах, альгаробилла, мироболаны). Как кислоты, Д. вещества образуют металлические производные -- соли, из которых свинцовые, представляющие нерастворимые в воде аморфные осадки, нередко применяются для извлечения Д. вещества из водных экстрактов Д. материалов, а также при анализе.
1.Реакция Стиасни – с 40 % раствором формальдегида и конц. HCl -
Конденсированные дубильные вещества образуют осадок кирпично-красного цвета
2.Бромная вода (5 г брома в 1 л воды) - к 2-3 мл испытуемого раствора прибавляют по каплям бромную воду до появления в растворе запаха брома; в случае присутствия конденсированных дубил ьных веществ образуется оранжевый или желтый осадок.
3. Окрашивание с солями трехвалентного железа, железоаммонийными квасцами –
черно-синее (дубильные вещества гидролизуемой группы, которые являются производными пирогаллола)
или черно-зеленое (дубильные вещества конденсированной группы, которые являются производными пирокатехина).
4.Катехины дают красное окрашивание с ванилином
(в присутствии конц. HCl или 70 %-ной H 2 SO 4 развивается яркая красная окраска).
Катехины образуют при этой реакции окрашенный продукт следующего строения:
- Реакцией отличающей пирогалловые танниды от пирокатехиновых является реакция нитрозометилуретаном.
При кипячении растворов дубильных веществ с нитрозометилуретаном танниды пирокатехинового ряда осаждаются полностью,
а присутствие пирогалловых таннидов можно обнаружить в фильтрате путем прибавления железоаммиачных квасцов и натрия ацетата – фильтрат окрашивается в фиолетовый цвет.
- Свободная эллаговая кислота дает красно-фиолетовую окраску при добавлении нескольких кристаллов нитрита натрия и трех-четырех капель уксусной кислоты.
7. Для обнаружения связанной эллаговой кислоты (или гаксаоксидифеновой) уксусную кислоту заменяют 0,1 н. серной или соляной кислотой (кармино-красная окраска, переходящая в синюю).
8. Дубильные вещества с белками создают непроницаемую для воды пленку (дубление). Вызывая частичное свертывание белков, они образуют на слизистых оболочках и раневых поверхностях защитную пленку.
9. При соприкосновении с воздухом (например, резке свежих корневищ) дубильные вещества легко окисляются , превращаясь во флобафены или красени, которые обусловливают темно-бурую окраску многих кор и других органов, настоев.
Флобафены нерастворимы в холодной воде, растворяются в горячей воде, окрашивая отвары и настой в бурый цвет.
10. С 10 %-ным раствором среднего ацетата свинца (одновременно добавляют 10 %-ный раствор уксусной кислоты) :
образуется белый осадок, нерастворимый в уксусной кислоте – дубильные вещества гидролизуемой группы
(осадок отфильтровывают и в фильтрате определяют содержание конденсированных дубильных веществ, с 1 %-ным раствором железоаммонийных квасцов – черно-зеленое окрашивание);
белый осадок, растворимый в уксусной кислоте – дубильные вещества конденсированной группы.
11. Для идентификации отдельных соединений используют хроматографический анализ , рассматривая в УФ-свете. Обработку хроматограмм производят раствором железа хлорида или ванилиновым реактивом
Структуру устанавливают с помощью ИК-спектров, ПМР-спектров.
Реакция с 1 %-ным спиртовым раствором железоаммониевых квасцов является фармакопейной , проводится с отваром из сырья – кора дуба, корневище змеевика, соплодия ольхи, плоды черники;
А также непосредственно в сухом сырье – кора дуба, кора калины, корневища бадана.
Количественное определение.
1. Гравиметрические или весовые методы – основаны на количественном осаждении дубильных веществ желатином, ионами тяжелых металлов или адсорбцией кожным (гольевым) порошком.
Официальным в дубильно-экстрактовой промышленности является весовой единый метод (ВЕМ):
В водных вытяжках из растительного материала вначале определяют общее количество растворимых веществ (сухой остаток) путем высушивания определенного объема вытяжки до постоянной массы;
затем из вытяжки удаляют дубильные вещества, обрабатывая ее обезжиренным кожным порошком; после отделения осадка в фильтрате вновь устанавливают количество сухого остатка.
Разность в массе сухого остатка до и после обработки вытяжки кожным порошком показывает количество подлинных таннидов.
2. Титриметрические методы .
К ним относятся:
1) Желатиновый метод - Метод Якимова и Курницкой – основан на способности дубильных веществ образовывать нерастворимые комплексы с белками. Водные извлечения из сырья титруют 1 % раствором желатина, в точке эквивалентности комплексы желатино-таннаты растворяются в избытке реактива.
Титр устанавливают по чистому таннину. Точку валентности определяют путем отбора наименьшего объема титрованного раствора, вызывающего полное осаждение дубильных веществ.
Метод наиболее точный , т.к. позволяет определить количество истинных дубильных веществ.
Недостатки: длительность определения и трудность установления точки эквивалености.
2) Перманганатометрический метод (метод Левенталя в модификации Курсанова). Это фармакопейный метод, основан на легкой окисляемости перманганатом калия в кислой среде в присутствии индикатора и катализатора индигосульфокислоты , которая в точке эквивалентности раствора меняется от синего до золотисто-желтого.
Особенности определения, позволяющие оттитровать только макромолекулы дубильных веществ: титрование проводится в сильно разбавленных растворах (извлечение разбавляеттся в 20 раз) при комнатной температуре в кислой среде, перманганат добавляется медленно, по каплям, при интенсивном перемешивании.
Метод экономичный, быстрый, прост в исполнении, но недостаточно точен, так как перманганат калия окисляет частично и низкомолекулярные фенольные соединения.
3) Для количественного определения таннина в листьях сумаха и скумпии используется метод осаждения дубильных веществ сульфатом цинка с последующим комплексонометрическимтитрованием трилоном Б в присутствии ксиленолового оранжевого.
Физико-химические методы.
1) Фотоэлектроколориметрические - основаны на способности ДВ образовывать окрашенные соединения с солями трехвалентного железа, фосфорно-вольфрамовой кислотой, реактивом Фолина-Дениса и др.
2) Хроматоспектрофотометрические и нефелометрические методы используют в научных исследованиях.
0Кафедра управления и экономики фармации, фармацевтической технологии и фармакогнозии
ВЫПУСКНАЯ КВАЛИФИКАЦИОННАЯ РАБОТА
На тему СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СВЕЖЕСОБРАННОГО И ГОТОВОГО ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ, СОДЕРЖАЩЕГО ДУБИЛЬНЫЕ ВЕЩЕСТВА
Список сокращений
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ДУБИЛЬНЫЕ ВЕЩЕСТВА
2. 1. Объекты исследования
ГЛАВА 3. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ СОДЕРЖАНИЯ ДУБИЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ В СВЕЖЕСОБРАННОМ И ГОТОВОМ ЛЕКАРСТЕННОМ
РАСТИТЕЛЬНОМ СЫРЬЕ
Список литературы
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АД - артериальное давление
БУВ - бутанол-кислота уксусная-вода
ВЕМ - весовой единый метод
ГСО - государственный стандартный образец
ГФ - государственная фармакопея
конц. - концентрированный
ЛС - лекарственное средство
ЛП - лекарственный препарат
ЛРС - лекарственное растительное сырье
НД - нормативная документация
УФ-лучи - ультрафиолетовые лучи
ВВЕДЕНИЕ
Дубильные вещества - группа разнообразных и сложных по составу растворимых в воде органических веществ ароматического ряда, содержащих гидроксильные радикалыфенольного характера .
Дубильные вещества широко распространены в растительном царстве, обладают характерным вяжущим вкусом. Лекарственные растения, содержащие дубильные вещества, распространенны и на территории Воронежской области.
В настоящее время сырье и препараты, содержащие дубильные вещества, применяются наружно и внутрь как вяжущие, противовоспалительные, бактерицидные и кровоостанавливающие средства. Действие основано на способности дубильных веществ связываться с белками с образованием плотных альбуминатов .
Актуальность темы объясняется тем, что содержание дубильных веществ в готовых лекарственных препаратах (ЛП) и готовом лекарственном растительном сырье (ЛРС) зачастую меньше, чем в свежесобранном сырье. На их содержание влияют большое количество факторов таких, как условия сбора и сушки, хранения самого сырья и готового лекарственного препарата.
Целью дипломной работы явился изучение лекарственного растительного сырья, содержащего дубильные вещества, произрастающие в Воронежской области.
Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:
Изучить теоретические основы представления о дубильных веществах;
Изучить лекарственные растения Воронежской области, содержащие дубильные вещества;
Провести анализ содержания дубильных веществ в свежесобранном и в готовом ЛРС.
В качестве объекта исследования было выбрано свежесобранное и готовое ЛРС двух видов растений, произрастающих на территории Воронежской области: дуб обыкновенный (Quercus robur) и череда трехраздельная (Bidens tripartita).
Для определения количественного содержания дубильных веществ в сырье был использован метод спектрофотометрии.
Исследования проводились на базе ВГМА, на кафедре управления и экономики фармации, фармацевтической технологии и фармакогнозии.
ГЛАВА 1. ДУБИЛЬНЫЕ ВЕЩЕСТВА
1. 1. Общее понятие дубильных веществ и их распространение
Дубильными веществами (таннидами) называются растительные полифенольные соединения с молекулярной массой от 500 до 3000, способные образовывать прочные связи с белками и алкалоидами и обладающие дубящими свойствами.
Названы так по своей способности дубить невыделанную шкуру животных, превращая ее в прочную кожу, устойчивую к воздействию влаги и микроорганизмов, ферментов, то есть не поддающаяся гниению.
Эта способность дубильных веществ основана на их взаимодействии с коллагеном (белком кожных покровов), приводящих к образованию устойчивой поперечносвязанной структуры - кожи за счет возникновения водородных связей между молекулами коллагена и фенольными гидроксилами дубильных веществ .
Но эти связи могут образовываться в тех случаях, когда молекулы достаточно велики, чтобы присоединить соседние цепочки коллагена, и имеют достаточное количество фенольных групп для образования поперечных связей.
Полифенольные соединения с более низкой молекулярной массой (менее 500) только адсорбируются на белках и не способны образовывать устойчивые комплексы, в качестве дубителей не используются.
Высокомолекулярные полифенолы (с молекулярной массой более 3000) также не являются дубителями, так как их молекулы слишком велики и не проникают между фибриллами коллагена.
Степень дубления зависит от характера мостиков между ароматическими ядрами, т. е. от строения самого дубильного вещества и от ориентации молекулы таннида по отношению к полипептидным цепям белка.
При плоском расположении таннида на белковой молекуле возникают устойчивые водородные связи:
Прочность соединения таннидов с белком зависит от числа водородных связей и от молекулярной массы.
Наиболее надежные показатели наличия дубильных веществ в растительных экстрактах - необратимая адсорбция дубильных веществ на кожном (гольевом) порошке и осаждение желатины из водных растворов.
Термин «дубильные вещества» впервые был использован в 1796 году французским исследователем Сегеном для обозначения присутствующих в экстрактах некоторых растений веществ, способных осуществлять процесс дубления. Практические вопросы кожевенной промышленности положили начало изучению химии дубильных веществ .
Другое название дубильных веществ - «танниды» - происходит от латинизированной формы кельтского названия дуба - «тан», кору которого издавна использовали для обработки шкур.
Первые научные исследования в области химии дубильных веществ относятся ко второй половине 18 века.
Первая опубликованная работа - работа Гледича в 1754 году «Об использовании плодов черники, как сырья для получения дубильных веществ». Первой монографией была монография Деккера в 1913 году, которая обобщала весь накопленный материал по дубильным веществам.
С исследованиями строения дубильных веществ связаны имена крупнейших зарубежных химиков: Г. Проктера, Э. Фишера, К. Фрейденберга, П. Каррера.
Дубильные вещества являются производными пирогаллола, пирокатехина, флороглюцина. Простые фенолы дубящее действие не оказывают, но вместе с фенолкарбоновыми кислотами сопутствуют дубильным веществам.
В природе многие растения (особенно двудольные) содержат дубильные вещества. Среди низших растений они встречаются в лишайниках, грибах, водорослях, среди споровых - во мхах, хвощах, папоротниках. Богаты дубильными веществами представители семейств сосновых, ивовых, гречишных, вересковых, буковых, сумаховых .
Семейства розоцветных, бобовых, миртовых насчитывают многочисленные роды и виды, в которых содержание дубильных веществ доходит до 20-30% и более. Больше всего (до 50-70%) дубильных веществ найдено в патологических образованиях - галлах. Наиболее богаты дубильными веществами тропические растения .
Дуб, лапчатка, змеевик, кровохлебка, бадан толстолистный, скумпия кожевенная как впрочем, и многие другие растения содержат дубильные вещества смешанной группы - конденсированные и гидролизуемые.
Дубильные вещества содержатся в подземных и надземных частях растений: накапливаются в клеточном соке. В листьях дубильные вещества, или танниды, обнаружены в клетках эпидермы и паренхимы, окружающих проводящие пучки и жилки, в корневищах и корнях -накапливаются в паренхиме коры и сердцевинных лучах.
1. 2. Классификация дубильных веществ
Дубильные вещества - это смеси различных полифенолов, то из-за разнообразия их химического состава классификация затруднена.
По классификации Проктера (1894) дубильные вещества в зависимости от природы продуктов их разложения при температуре 180-200 0 С (без доступа воздуха) подразделил на две основные группы:
1. пирогалловые (дают при разложении пирогаллол);
2. пирокатехиновые (образуется пирокатехин) (табл. 1)
В результате дальнейшего исследования химизма танидов Фрейденберг в 1933 году уточнил классификацию Проктера и рекомендовал обозначить первую группу (пирогалловые дубильные вещества) как гидролизуемые дубильные вещества, а вторую (пирокатехиновые дубильные вещества) -конденсированные .
Большинство дубильных веществ растений невозможно однозначно отнести к типу гидролизуемых или конденсированных, поскольку эти группы во многих случаях недостаточно резко разграничены.
В растениях часто содержится смесь дубильных веществ обеих групп
В настоящее время наиболее часто пользуются классификацией Фрейденберга, который выделяет 2 основных группы:
1. Гидролизуемые дубильные вещества:
Галлотанины - эфиры галловой кислоты и сахаров;
Несахаридные эфиры фенолкарбоновых кислот;
Эллаготанины - эфиры эллаговой кислоты и сахаров.
2. Конденсированные дубильные вещества:
Производные флаванолов- 3;
Производные флавандиолов- 3, 4;
Производные оксистильбенов .
1. 3. Методика определения качественного и количественного содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье
Реакции, для обнаружения дубильных веществ:
Специфической реакцией на дубильные вещества является реакция осаждения желатином. Используют 1%-й раствор желатина на 10%-ном растворе хлорида натрия. Появляется хлопьевидный осадок, растворимый в избытке желатина. Отрицательная реакция с желатином свидетельствует об отсутствии дубильных веществ.
Реакция с солями алкалоидов. Образуется аморфный осадок за счет образования водородных связей с гидроксильными группами дубильных веществ и атомами азота алкалоида.
Эти реакции дают одинаковый результат независимо от группы дубильных веществ.
Реакции, для определения группы дубильных веществ:
Реакция Стиасни - с 40 % раствором формальдегида и конц. HCl -Конденсированные дубильные вещества образуют осадок кирпично-красного цвета
Бромная вода (5 г брома в 1 л воды) - к 2-3 мл испытуемого раствора прибавляют по каплям бромную воду до появления в растворе запаха брома; в случае присутствия конденсированных дубильных веществ образуется оранжевый или желтый осадок.
Окрашивание с солями трехвалентного железа, железоаммонийными квасцами - черно-синее (дубильные вещества гидролизуемой группы, которые являются производными пирогаллола) или черно-зеленое (дубильные вещества конденсированной группы, которые являются производными пирокатехина).
Катехины дают красное окрашивание с ванилином (в присутствии конц. HCl или 70 %-ной H 2 SO 4 развивается яркая красная окраска).
Катехины образуют при этой реакции окрашенный продукт следующего строения:
Количественное определение.
1) Гравиметрические или весовые методы - основаны на количественном осаждении дубильных веществ желатином, ионами тяжелых металлов или адсорбцией кожным (гольевым) порошком.
Официальным в дубильно-экстрактовой промышленности является весовой единый метод (ВЕМ):
В водных вытяжках из растительного материала вначале определяют общее количество растворимых веществ (сухой остаток) путем высушивания определенного объема вытяжки до постоянной массы; затем из вытяжки удаляют дубильные вещества, обрабатывая ее обезжиренным кожным порошком; после отделения осадка в фильтрате вновь устанавливают количество сухого остатка. Разность в массе сухого остатка до и после обработки вытяжки кожным порошком показывает количество подлинных таннидов .
2) Титриметрические методы
Желатиновый метод - Метод Якимова и Курницкой - основан на способности дубильных веществ образовывать нерастворимые комплексы с белками. Водные извлечения из сырья титруют 1 % раствором желатина, в точке эквивалентности комплексы желатино-таннаты растворяются в избытке реактива. Титр устанавливают по чистому таннину. Точку валентности определяют путем отбора наименьшего объема титрованного раствора, вызывающего полное осаждение дубильных веществ.
Метод наиболее точный, т. к. позволяет определить количество истинных дубильных веществ.
Недостатки: длительность определения и трудность установления точки эквивалености.
Перманганатометрический метод (метод Левенталя в модификации Курсанова). Это фармакопейный метод, основан на легкой окисляемости перманганатом калия в кислой среде в присутствии индикатора и катализатора индигосульфокислоты, которая в точке эквивалентности раствора меняется от синего до золотисто-желтого.
Особенности определения, позволяющие оттитровать только макромолекулы дубильных веществ: титрование проводится в сильно разбавленных растворах (извлечение разбавляеттся в 20 раз) при комнатной температуре в кислой среде, перманганат добавляется медленно, по каплям, при интенсивном перемешивании.
Метод экономичный, быстрый, прост в исполнении, но недостаточно точен, так как перманганат калия окисляет частично и низкомолекулярные фенольные соединения.
3) Физико-химические методы
Фотоэлектроколориметрический метод. Основан на способности ДВ образовывать окрашенные химические соединения с солями железа (III), фосфорно-вольфрамовой кислотой, реактивом Фолина-Дениса и другими веществами. К исследуемому извлечению из ЛРС добавляют один из реактивов, после появления устойчивой окраски измеряют оптическую плотность на фотоколориметре. Процентное содержание ДВ определяют по калибровочному графику, постороенному с использованием серии растворов танина известной концентрации.
Спектрофотометрическое определение. После получения водного извлечения часть его центрифугируют в течение 5 мин при 3000 об/мин. К центрифугату добавляют 2 % водной раствор аммония молибдата, после чего разбавляют водой и оставляют на 15 мин. Интенсивность образовавшейся окраски измеряют на спектрофотометре при длине волны 420 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Расчет танидов производят по стандартному образцу. В качестве стандартного образца используют ГСО танина.
Хроматографическое определение. Для идентификации конденсированных дубильных веществ получают спиртовое (95 % этиловый спирт) и водное извлечения и проводят бумажную и тонкослойную хроматографию. В качестве стандартного образца используют ГСО катехина. Разделение осуществляют в системах растворителей бутанол - кислота уксусная - вода (БУВ) (40: 12: 28), (4: 1: 2), 5 % уксусная кислота на бумаге марки "Filtrak” и пластинках "Silufol”. Обнаружение зон веществ на хроматограмме проводят в УФ-свете, с последующей обработкой 1 % раствором железоаммониевых квасцов или 1 % раствором ванилина, концентрированной кислотой хлористоводородной. В дальнейшем возможно проведение количественного анализа путём элюирования с пластины ДВ спиртом этиловым и проведения спектофотометрического анализа, снимая спектр поглощения в интервале 250-420 нм .
Амперометрический метод. Сущность метода заключается в измерении электрического тока, возникающего при окислении групп -ОН природных антиоксидантов фенольной природы на поверхности рабочего электрода при определенном потенциале. Предварительно строят графическую зависимость сигнала образца сравнения (кверцетина) от его концентрации и с помощью полученной градуировки рассчитывают содержание фенолов в исследуемых образцах в единицах концентрации кверцетина.
Потенциометрическое титрование. Данный вид титрования водного извлечения (в частности, отваров коры дуба) производили раствором калия перманганата (0, 02 М), результаты регистрировали с помощью рН-метра (рН-410). Определение конечной точки титрования проводилось по методу Грана с использованием компьютерной программы "GRAN v. 0. 5” . Потенциометрический вид титрования дает более точные результаты, так как при этом точка эквивалентности четко фиксируется, что исключает необъективность результатов за счет человеческого фактора. Потенциометрическое титрование особенно актуально по сравнению с индикаторным при исследовании цветных растворов, таких как водные извлечения, содержащие дубильных веществ.
Кулонометрическое титрование. Метод количественного определения содержания дубильных веществ в ЛРС в пересчете на танин путем кулонометрического титрования заключается в том, что исследуемое извлечение из сырья вступает в реакцию с кулонометрическим титрантом - гипоиодит-ионами, которые образуются при диспропорционировании электрогенерированного йода в щелочной среде. Электрогенерация гипоиодит-ионов осуществляется из 0, 1 М раствора йодида калия в фосфатном буферном растворе (рН 9, 8) на платиновом электроде при постоянной силе тока 5, 0 мА .
Таким образом, для количественного определения дубильных веществ в ЛРС используются такие методы количественного определения дубильных веществ в ЛРС, как титриметрические (в том числе титрование желатином, перманганатом калия, комплексонометрическое титрование трилоном Б, потенциометрическое и кулонометрическое титрование), гравиметрические, фотоэлектроколориметрические, спектрофотометрические, амперометрические методы.
1. 4. Применение дубильных веществ
Лекарственное сырьё, содержащее дубильные вещества, применяют для получения препаратов, используемых как вяжущие, кровоостанавливающие, противовоспалительные, антимикробные средства. Сырьё, содержащее конденсированные дубильные вещества, может применяться как антиоксидант. Кроме того, установлено, что гидролизуемые и конденсированные дубильные вещества проявляют высокую Р-витаминную активность, антигипоксическое и антисклеротическое действие. Конденсированные дубильные вещества проявляют противоопухолевый эффект, они способны гасить цепные свободнорадикальные реакции, что объясняет их определённую эффективность в химиотерапии рака. Причём в больших дозах танниды проявляют противоопухолевое действие, в средних дозах -радиосенсибилизирующее, а в малых - противолучевое.
Сырье и препараты, содержащие дубильные вещества, применяются наружно и внутрь как вяжущие, противовоспалительные, бактерицидные и кровоостанавливающие средства. Действие основано на способности дубильных веществ связываться с белками с образованием плотных альбуминатов.
При соприкосновении с воспаленной слизистой оболочкой или раневой поверхностью образуются тонкая поверхностная пленка, защищающая от раздражения чувствительные нервные окончания. Происходит уплотнение клеточных мембран, сужение кровеносных сосудов, уменьшается выделение экссудатов, что приводит к уменьшению воспалительного процесса.
Благодаря способности дубильных веществ образовывать осадки с алкалоидами, сердечными гликозидами, солями тяжелых металлов их используют как антидоты при отравлении этими веществами.
Наружно при заболеваниях полости рта, зева, гортани (стоматиты, гингивиты, фарингиты, ангины), а также при ожогах применяют отвары коры дуба, корневищ бадана, змеевика, лапчатки, корневищ и корней кровохлебки, и препарат «Альтан».
Внутрь при желудочно-кишечных заболеваниях (колитах, энтероколитах, поносах, дизентерии) применяют препараты танина («Танальбин», «Тансал», «Альтан», отвары плодов черники, черемухи (особенно в детской практике»), соплодий ольхи, корневищ бадана, змеевика, лапчатки, корневищ и корней кровохлебки.
Как кровоостанавливающие средства при маточных, желудочных и геморроидальных кровотечениях применяют отвары коры калины, корневищ и корней кровохлебки, корневищ лапчатки, соплодий ольхи.
Отвары готовят в соотношении 1: 5 или 1: 10. Нельзя применять сильно концентрированные отвары, так как при этом, пленка альбуминатов высыхает, появляются трещины и возникает вторичный воспалительный процесс.
Экспериментально установлено противоопухолевое действие дубильных веществ водного экстракта экзокарпия плодов гранатника (при лимфосаркоме, саркоме и других заболеваниях) и препарата «Ханерол», полученного основе соцветий кипрея обыкновенного (Иван-чай) при раке желудка и легких.
Дубильные вещества можно использовать как противоядия при отравлении гликозидами, алкалоидами и солями тяжёлых металлов.
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2. 1. Объекты исследования
На территории Воронежской области наиболее часто встречаются семейства растений, содержащих дубильные вещества: Буковые - Fagaceae, (дуб черешчатый - Quercus robur), Астровые - Asteraceae (череда трехраздельная - Bidens tripartita), семейства Розовые - Rosaceae обыкновенная - Padus avium), Ивовые - Salicaceae (Ива белая - Salix alba), гераниевых - Geraniaceae (герань леснаая - Geranium sylvaticum) и др.
В данной работе в качестве объектов исследования были выбраны такие лекарственные растения, как дуб обыкновенный (Quercus robur) и череда трехраздельная (Bidens tripartita).
1) Дуб черешчатый (обыкновенный) - Quercus robur L. (рис. 1) Используемое сырье - кора дуба (Cortex Quercus).
Семейство буковые - Fagaceae
Рис. 1. Дуб черешчатый
Ботаническая характеристика. Дуб черешчатый - дерево высотой до 40 м, с широкой, раскидистой кроной, стволом до 7 м в диаметре, темно-коричневой корой. Листья обратно-яйцевидные, перисто-лопастные, с опадающими прилистниками, кожистые, сверху блестящие, снизу светло-зеленые, короткочерешковые; распускаются позднее, чем у многих древесных пород. Цветение дуба начинается с 50-летнего возраста. Цветет одновременно с распусканием листьев. Цветки однополые: мужские - в повислых кистях-сережках, женские - сидячие, по 1 -2, с многочисленными чешуйчатыми обвертками. Плод - односемянный желудь, сидит в плюске на длинной плодоножке. Деревья, растущие свободно, плодоносят ежегодно, в лесу - через 4-8 лет. Цветет в мае, плоды созревают в сентябре.
Распространение. Европейская часть страны. На севере доходит до Санкт-Петербурга и Вологды, восточная граница распространения - Урал. В Сибири не растет. На Дальнем Востоке, в Крыму и на Кавказе встречаются другие виды. Дуб черешчатый - основная порода широколиственных лесов.
Местообитание. В лесостепных и степных зонах на юго-востоке образует леса на водоразделах и по балкам. Растет обычно на удобренной и влажной почве, но встречается также на довольно сухих почвах. Иногда образует обширные дубовые леса.
Заготовка. Кора заготавливается ранней весной, во время сокодвижения, когда она легко отделяется от древесины, на местах рубок с ветвей и молодых стволов до распускания листьев. Стволы старых деревьев, как правило, покрыты толстым пробковым слоем с трещинами. Кора таких деревьев непригодна к заготовке. В молодой коре значительно больше дубильных веществ. Для снятия коры делают кольцевые надрезы ножом на расстоянии 3035 см один от другого, а затем соединяют их продольными разрезами. Целесообразно проводить поиски аналогов дуба.
Охранные мероприятия. Заготовка ведется с разрешения лесничества в специально отведенных местах. Дуб растет медленно.
Сушка. В тени, под навесом или в хорошо проветриваемом помещении. Нужно следить, чтобы в сырье не попала дождевая вода, так как подмоченная кора теряет значительное количество дубильных веществ. При сушке кору перевертывают; к вечеру заносят в помещения. Перед упаковкой (кору связывают в пучки) просматривают высушенное сырье, удаляют кору с остатками древесины, покрытую мхом.
Внешние признаки. Трубчатые желобоватые куски или узкие полоски различной длины, но не менее 3 см, толщиной около 2-3 мм, но не более 6 мм. Наружная поверхность коры светло-бурая или светло-серая, серебристая ("зеркальная"), реже матовая, гладкая или слегка морщинистая, но без трещин. Часто заметны поперечно вытянутые чечевички, внутренняя поверхность желтовато- или красновато-бурая с многочисленными продольными тонкими выдающимися ребрышками. Излом наружной коры зернистый, ровный, внутренней - сильно волокнистый, "занозистый". Сухая кора без запаха, но при смачивании водой появляется своеобразный запах. Вкус сильновяжущий. При смачивании внутренней поверхности коры раствором железоаммониевых квасцов появляется черно-синее окрашивание (дубильные вещества). Снижают качество сырья старая кора (толще 6 мм), потемневшие куски и куски короче 3 см, органические примеси.
На микроскопии - бурая пробка, механический пояс, каменистые клетки большими группами, лубяные волокна с кристаллоносной обкладкой, сердцевинные лучи (на поперечном срезе).
Возможные примеси. Кора ясеня - Fraxinus excelsior L. - матовая, серая, легко отличается по морфолого-анатомическим признакам. Под микроскопом виден прерывистый механический пояс с незначительным числом каменистых клеток. Волокна без кристаллоносной обкладки.
Химический состав. Кора содержит 10-20% дубильных веществ (по ГФ XI требуется не менее 8%) - производных галловой и эллаговой кислот; 13-14% пентозанов; до 6% пектиновых веществ; кверцетин и сахара.
Хранение. В сухих, хорошо проветриваемых помещениях, упаковав в тюки по 100 кг. Срок хранения до 5 лет.
Фармакологические свойства. Отвары коры дуба обладают вяжущими, денатурирующими белки свойствами, что обеспечивает противовоспалительное действие при наружном и внутреннем применении.
При экспериментальных исследованиях действия отваров коры дуба, введенных в желудок, обнаружено усиление моторики желудка, уменьшение сокоотделения, снижение ферментативной активности и кислотности желудочного содержимого, замедление всасывания слизистой оболочкой желудка.
Все части растения оказывают дезинфицирующее действие. Галловая кислота и ее производные обладают широкой фармакологической активностью, аналогичной действию биофлавоноидов: уплотняют сосудисто-тканевые мембраны, повышают их прочность и снижают проницаемость, обладают противолучевым и антигеморрагическим свойством.
Противомикробное и противопротозойное действие связано как с производными галловой кислоты, так и с наличием катехинов.
Водный отвар желудей дуба, очищенных от кожуры, и настойка 1: 5 и 1: 10 на спирте (с удаленным спиртом) у кроликов с аллоксановым диабетом снижают содержание сахара в крови, увеличивают количество гликогена в печени и в сердечной мышце.
Применение. Отвары коры дуба (1: 10) применяют при острых и хронических воспалительных заболеваниях полости рта в виде полосканий, аппликаций на десны при стоматитах, гингивитах и т. д.
Как противоядие при отравлениях солями тяжелых металлов, алкалоидами, грибами, беленой, дурманом, при пищевых токсикоинфекциях и других отравлениях применяют 20% отвар коры дуба для повторных промываний желудка .
При ожогах и отморожениях также используют 20% отвар коры дуба в виде аппликаций салфеток, смоченных холодным отваром, на пораженные места в первые сутки. При заболеваниях кожи, сопровождающихся мокнутием, при детских диатезах отвар коры дуба применяют в виде общих или местных ванн, обмываний, аппликаций; при потливости стоп рекомендуют местные ванночки из 10% отвара коры дуба или отвара коры дуба пополам с отваром шалфея. При гинекологических заболеваниях (кольпиты, вульвовагиниты, опущение стенок влагалища, выпадение влагалища и матки, эрозии шейки матки и стенок влагалища) назначают спринцевания 10% отваром.
Реже кору дуба используют при гастроэнтероколитах, дизентерии, небольших желудочно-кишечных кровотечениях (внутрь 10% отвар), при проктитах, парапроктитах, трещинах заднего прохода, геморрое, выпадении прямой кишки (лечебные клизмы, обмывания, аппликации, сидячие ванны).
Отвар коры дуба (Decoctum corticis Quercus) готовят в соотношении 1: 10. Кору измельчают до величины частиц не более 3 мм, помещают в эмалированную посуду, заливают горячей кипяченой водой, закрывают крышкой, нагревают на кипящей водяной бане при частом помешивании в течение 30 минут, охлаждают 10 мин, процеживают, отжимают, объем полученного отвара доливают кипяченой водой до 200 мл.
В аптеке, из ЛП, содержащих кору дуба, встречаются «Дуба кора» и стоматологический гель «Витадент».
«Витадент» используется для лечения и профилактики воспалительных заболеваний полости рта и пародонта.
«Дуба кора» применяется для лечения стоматита, гингивита, тонзиллита, фарингита, устранения и профилактики неприятного запах изо рта; при ожогах, отморожениях, инфицированных ранах, пролежнях, мозолях.
2) Череда трехраздельная - Bidens tripartita
Используемое сырье - трава череды (Herba Bidentis) (рис. 2)
Рис. 2. Череда трехраздельная
Ботаническая характеристика. Однолетнее травянистое растение высотой от 15 до 100 см. Корни стержневые, разветвленные. Стебель круглый, супротивно-ветвящийся. Листья короткочерешковые, трехраздельные, с более крупной по краю ланцетной и пильчатой средней долей, расположены супротивно. Корзинки, чаще одиночные на концах веток, обертка двухрядная. Цветки трубчатые грязновато-желтые. Плод - семянка клиновидная, сплюснутая, длиной 6-8 мм, с двумя "цепкими" остями на верхушке. Цветет с июня по сентябрь, плодоносит в августе-сентябре. Возможная примесь -другие, вместе растущие, виды череды. Изучены и подтверждаются лечебные свойства череды лучистой и поникшей, но они пока не заготовляются, так же как и посконник.
Распространение. Повсеместно, кроме Крайнего Севера.
Местообитание. Растение влаголюбивое. Растет в сырых местах, по болотам, берегам рек и ручьев, на огородах как сорняк.
Заготовка. Траву или листья длиной до 15 см срезают или ощипывают в фазе вегетации до образования бутонов. В более поздние сроки собирают только боковые побеги. Сырье очищают от грубых цветоносных стеблей. На плантациях применяют механизированный сбор облиственных стеблей череды.
Семейство астровые - Asteraceae
Охранные мероприятия. Растение культивируется. При заготовке на лугах не следует вытаптывать череду и травяной покров.
Сушка. В сушилках естественного тепла. Сырье раскладывают слоем 5-7 см. Конец сушки определяют по ломкости черешков и стеблей. Выход сухого сырья 25%. В начале сушки сырье следует ежедневно переворачивать. При искусственной сушке допускается температура до 35-40°С.
Внешние признаки. По ГФ XI сырье состоит из верхних олиственных стеблей длиной до 15 см, с бутонами или без них. Цвет темно-зеленый. Запах своеобразный, усиливающийся при растирании. Вкус вяжуще-горьковатый. Снижают качество сырья примеси в виде стеблей длиннее 15 см, побуревших частей и частей других растений, семян. Подлинность сырья определяется по внешним признакам и микроскопически. Характерны многоклеточные волоски двух типов: гусеничные - состоят из 9-12 (до 18) коротких, с тонкими оболочками клеток, у основания волоска лежит вытянутая крупная клетка, покрытая складчатой кутикулой; более крупные волоски с толстыми оболочками - основание волоска многоклеточное, часто клетки располагаются в 2-3 ряда; конечная клетка заостренная; поверхность волосков с продольными складками кутикулы.
Химический состав. Трава содержит эфирное масло, флавоноиды, производные коричной кислоты, дубильные вещества с большим содержанием фракции полифенолов (наибольшее количество в фазе бутонизации), полисахариды (2, 46%, ГФ XI не менее 3, 5%), каротиноиды и каротин (накапливаются ко времени цветения до 50-60 мг% в верхушках), аскорбиновую кислоту (во время цветения до 950 мг%), кумарины, халконы. Растение способно накапливать марганец.
Хранение. В сухом месте, упакованным в тюки, кипы или мешки. Срок годности 3 года.
Фармакологические свойства. Настойка череды, введенная в вену животного, обладает седативными свойствами, понижает аретриальное давление (АД), одновременно несколько увеличивает амплитуду сердечных сокращений. В экспериментах обнаружены антиаллергические свойства препаратов череды, которые объясняют высоким содержанием в растении аскорбиновой кислоты, стимулирующей функцию надпочечников и оказывающей разностороннее влияние на обменные процессы в организме. Антиаллергическое действие проявляется ослаблением симптомов экспериментального анафилактического шока и задержкой развития феномена Артюса у животных. При удалении гипофиза у экспериментальных животных антиаллергического действия череды не отмечено.
Комплекс флавоноидов и полисахаридов, череды трехраздельной, поникшей и лучевой обладает истинным холеретическим свойством. Комбинация флавоноидов и полисахаридов череды поникшей в эксперименте превосходит фламин по стимулирующему действию на холатосинтезирующую функцию, увеличивает содержание конъюгированных желчных кислот и показатель холатохолестеринового коэффициента желчи. Флавоноидам присущи гепатозащитные свойства, которые включают холеретическое, холатостимулирующее, противовоспалительное и капилляроукрепляющие компоненты. Сочетание в череде флавоноидов и водорастворимых полисахаридов способствует улучшению всасываемости растительного комплекса череды и повышению его активности. В эксперименте флавоноиды череды трехраздельной и поникшей устраняли действие гепатотропных ядов, восстанавливали секрецию желчи и уровень холатов до контрольных цифр. На обмен веществ влияют и ионы марганца, найденные в растении. Они входят в состав различных ферментных систем, влияют на процессы кроветворения, функцию печеночной клетки, тонус стенок сосудов, желчных ходов, способны предупреждать образование внутрисосудистых тромбов.
Эфирные экстракты из череды в эксперименте оказывают противомикробное действие в отношении грамположительных бактерий и некоторых патогенных грибов. Флавоноидные соединения череды (флавоны и халконы) обладают бактериостатическим и инсектицидным свойством.
Противомикробные и противовоспалительные свойства препаратов череды связаны также с дубильными веществами, в составе которых преобладают простейшие по строению полифенолы, обладающие более выраженными противомикробными свойствами, чем дубильные вещества типа танинов.
Выраженные противомикробные свойства череды связаны, кроме того, с большим содержанием марганца в ее препаратах.
Препараты череды при местном применении улучшают трофику тканей; при термическом ожоге у животных спиртовые экстракты череды оказывают противовоспалительное и защитное действие.
Применение. Череда относится к древнейшим народным ЛС. Внутрь череду принимают как мочегонное, потогонное и жаропонижающее средство в виде настоев и "чаев".
При заболеваниях почек и мочевыводящих путей рекомендуется следующий лекарственный сбор: череды 2 части, толокнянки 3 части, березовых почек 1 часть. Из сбора готовят отвар.
Череду применяют при псориазе, микробной экземе, эпидермофитии, гнездном облысении. При псориазе череду принимают внутрь в виде настоя (20, 0: 200, 0). Принимают настой по 1/4 стакана 2-3 раза в день.
При крапивнице применяют лекарственный сбор, в который входят трава череды, листья крапивы, трава (или цветки) тысячелистника, листья черной смородины, корни лопуха и листья земляники. Для приготовления настоя берут по 1 столовой ложке каждого растения и заливают 1 л холодной воды, кипятят на слабом огне 10 мин, процеживают и принимают по 2 столовые ложки каждый час до исчезновения высыпаний.
Смесь череды, листьев крапивы, цветков тысячелистника, листьев черной смородины по 10 г, травы трехцветной фиалки (20 г), корня лопуха (15 г) и листьев земляники (15 г) используют при кожных заболеваниях в виде отвара (1 столовая ложка сбора на 200 мл воды).
При кожных заболеваниях (диатез) и рахите череду применяют также в виде настоя (из 10-30 г травы) для ванны. Настой выливают в ванну и добавляют 100 г поваренной или морской соли. Температура воды в ванне 37-38°С. При мокнущих экземах и диатезах назначают общие и местные ванны с травой череды, дубовой корой и цветками ромашки. Берут по 1 столовой ложке каждого растения, настаивают в 1 л холодной воды 10-12 ч. Затем доводят до кипения, процеживают и выливают настой в ванну (для детской ванны 10 л воды, температура 37-38°С). При купании больного с экссудативным диатезом и кожными высыпаниями концентрацию череды можно увеличить в 2-3 раза. При всех видах локальных зудящих дерматозов используют местные ванны (например, для конечностей; сидячие ванны при зуде промежности у больных сахарным диабетом, при геморрое). При зуде в области спины, шеи, подмышечной и паховой областях можно рекомендовать аппликации распаренной травы череды или компрессы с крепкими настоями. При нейродермитах, сопровождающихся выраженным зудом, настой череды применяют в виде аппликаций с местноанестезирующими веществами (новокаин, анестезин). При мокнущих диатезах у детей смачивают ткань отваром череды и накладывают на кожу, меняя примочки 5-6 раз в день. При явлениях воспаления примочки применяют холодными.
Наружно череду применяют также при лечении гнойных ран, трофических язв с признаками воспаления. Череда подсушивает раневую поверхность и способствует более быстрому заживлению пораженных участков кожи. Череда используется для приготовления ванночек, примочек и обтираний при микробной экземе стоп, эпидермофитии (лучшие результаты получены при лечении интертригинозной формы эпидермофитии).
Череду применяют как косметическое средство при угрях, себорее. Отваром череды умываются, делают косметические маски.
Настой травы череды (Infusum herbae Bidentis): 10 г травы помещают в эмалированную посуду, заливают 200 мл воды комнатной температуры, накрывают крышкой, нагревают на кипящей водяной бане при частом помешивании в течение 15 мин, охлаждают при комнатной температуре 45 мин, процеживают, добавляют воды до 200 мл. Принимают по 1 столовой ложке 2-3 раза в день.
В качестве ЛС встречается «Череды трава», выпускаемая в двух видах: измельченная и в фильтр-пакетах. К ЛП, содержащим траву череды относятся Элекасол, Бруснивер.
Бруснивер - препарат растительного происхождения, обладает диуретическим, противомикробным и противовоспалительным действием, применяемый при заболеваниях мочеполовых органов и прямой кишки.
Элекасол - комбинированный препарат растительного происхождения, оказывает противомикробное и противовоспалительное действие. Активен в отношении стафилококков, кишечной палочки, синегнойной палочки, протея. Стимулирует репаративные процессы. Применяется в комплексной терапии заболеваний дыхательных путей и ЛОР-органов (хронический тонзиллит, острый ларингофарингит, острый и хронический фарингит, трахеит, бронхит); в стоматологии (острый и рецидивирующий афтозный стоматит, красный плоский лишай слизистой оболочки полости рта, пародонтит); в гастроэнтерологии (хронический гастродуоденит, энтерит, колит, энтероколит); в дерматологии (микробная экзема, нейродермит, розовые угри, вульгарные угри); в гинекологии (неспецифические воспалительные заболевания влагалища и шейки матки, в т. ч. кольпит, цервицит, состояния после диатермо-и криодеструкции эрозии шейки матки); в урологии (хронический пиелонефрит, хронический цистит, уретрит, хронический простатит).
2. 2. Техника микроскопического исследования лекарственного растительного сырья
Для подтверждения подлинности сырья проводилось микроскопическое исследование ЛРС.
Микроскопическое исследование образцов проводили с использованием биологического микроскопа Motic BA 600 («Motic», страна-производитель Испания)
Микроскоп оборудован бинокулярной головной частью, широкопольными окулярами WF 10х/18, 4-х гнездной револьверной головкой, механическим предметным столиком с возможностью перемещения препарата в диапазоне 75х35 мм в направлении Х и Y, соответственно, с точностью 0. 1 мм, что позволяет выбирать оптимальное положение наблюдаемого объекта, имеет раздельную грубую и точную фокусировку. В стандартной комплектации применяется цифровая цветная 12-битная камера Motic Pro 285A. Микропрепарат представляется в виде виртуального препарата (графического файла).
Автоматическое цифровое сканирование биологических микропрепаратов осуществлялось с помощью программного обеспечения Motic Educator.
Растительный материал, отобранный для микроскопического изучения, помещают в пробирку и проводят его обработку для просветления: растительный материал заливают 2-3% раствором едкого натра (или водой очищенной) и кипятят в течение 1-2 мин. После этого жидкость осторожно сливают, а материал тщательно промывают водой и помещают в чашку Петри.
Кусочки сырья вынимают из воды с помощью скальпеля (или лопаточки) и препаровальной иглы и помещают на предметное стекло в каплю раствора глицерина или воды.
На предметном стекле его кусочек 4 мм разделяют скальпелем или препаровальной иглой на две части; одну из них осторожно переворачивают, чтобы получить возможность наблюдать сырье под микроскопом с верхней и нижней сторон.
Стекла, используемые для приготовления микропрепаратов, должны быть чистыми и сухими. Препарат на предметном стекле накрывают покровным стеклом. При неосторожном накладывании покровного стекла в препарате часто образуются пузырьки воздуха, поэтому стекло следует класть наклонно, прикоснувшись сначала одним краем к жидкости, а затем, придерживая стекло иглой, положить полностью. Попавшие пузырьки воздуха можно удалить легким постукиванием по покровному стеклу тупым концом препаровальной иглы или слегка подогреть над пламенем горелки. После охлаждения рассматривают под микроскопом, сначала при малом, затем при большом увеличении.
Если включающая жидкость не заполняет всего пространства между предметным и покровным стеклом или она испарилась при нагревании препарата, то ее добавляют сбоку небольшими каплями. Если наоборот, покровное стекло свободно плавает вследствие избыточного количества жидкости, то ее следует отсосать при помощи полоски фильтровальной бумаги, подведенной сбоку.
При приготовлении микропрепарата из толстых листьев предварительно раздавливают скальпелем толстые жилки, а с пластинки стараются снять эпидермис или, размяв лист, отделяют мезофилл от эпидермиса, чтобы препарат был более тонким .
2. 3. Спектрофотометрический метод исследования
Для сравнительной оценки содержания дубильных веществ в ЛСР использовался метод спектрофотометрии . Определение проводили на спектрофотометре «UNICO - 2800».
При определении наблюдался максимум поглощения водно-спиртового извлечения из сырья при длинне волны 276±2 нм. Этот показатель соответствует максимуму поглощения танина, что дало возможность использовать длину волны 276±2 нм как аналитический показатель присутствия дубильных веществ в сырье. В процессе спектрофотометрического определения дубильных веществ в коре дуба обыкновенного было выявлено суммарное содержание дубильных веществ в ЛРС .
Около 0, 8 г (точная навеска) измельченного до размера частиц 2 мм сырья заливали 100 мл воды и нагревали на кипящей бане в течении 30 мин с последующим 30-минутным отстаиванием при комнатной температуре. полученное извлечение фильтровали через складчатый бумажный фильтр в колбу емкостью 100 мл, и доводили водой до метки .
5 мл полученного извлечения помещали в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводили водой до метки спиртом этиловым 70%. Измеряли оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре кювете толщиной слоя 10 мм при длине волны от 274, 5 до 277, 5 нм относительно спирта этилового. Параллельно измеряли оптическую плотность образца танина .
где M CT - масса танина; M x - масса сырья; D CT - оптическая плотность раствора СО танина; Dx - оптическая плотность исследуемого раствора.
Спектрофотометрическое определение содержания дубильных веществ в коре дубе проводилось на двух видах сырья: свежесобранном (дата сбора -05. 05. 13г, сбор проводился на расстоянии 70 км от города оренбурга) и готовом ЛРС 9производитель ОАО «Красногорсклексредства». дта изготовления -01. 04. 2009г)
ГЛАВА 3. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ СОДЕРЖАНИЯ ДУБИЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ В СВЕЖЕСОБРАННОМ И ГОТОВОМ ЛЕКАРСТЕННОМ РАСТИТЕЛЬНОМ СЫРЬЕ
Был проведен микроскопический анализ ЛРС дуба обыкновенного и череды трехраздельной.
На поперечном срезе коры дуба виден бурый пробковый слой из многочисленных рядов клеток. В наружной коре находятся друзы кальция оксалата, группы каменистых клеток и имеющий диагностическое значение так называемый механический пояс, тангенциально расположенный на некотором расстоянии от пробки и состоящий из чередующихся групп лубяных волокон и каменистых клеток. В наружной коре по направлению от пояса внутрь разбросаны группы волокон и каменистых клеток. Некоторые клетки паренхимы содержат флобафены в виде включений красно-бурого цвета. Во внутренней коре заметны многочисленные тангенциально вытянутые группы лубяных волокон с кристаллоносной обкладкой, расположенные параллельными концентрическими поясами. Между группами волокон проходят однорядные сердцевинные лучи, реже встречаются более широкие лучи, которые близ камбия содержат группы каменистых клеток, что обусловливает при высыхании образование продольных ребер, видимых на внутренней поверхности коры (рис. 3). Порошок характеризуется наличием многочисленных обрывков групп волокон с кристаллоносной обкладкой и группами каменистых клеток, видны кусочки бурой пробки; изредка встречаются друзы кальция оксалата; содержимое паренхимных клеток окрашивается раствором квасцов железоаммонийных в черно-синий цвет.
Рис. 3. Микроскопия коры дуба (фрагмент поперечного среза):
1 - пробка; 2 - колленхима; 3 - друза кальция оксалата; 4 - механический пояс;
5 - каменистые клетки; 6 - лубяные волокна с кристаллоносной обкладкой; 7 - сердцевинный луч.
При рассмотрении листа череды трехраздельной с поверхности виден эпидермис верхней и нижней стороны с извилистыми стенками. Устьица многочисленные, окружены 3-5 клетками эпидермиса (аномоцитный тип). По всей пластинке листа встречаются простые «гусеницеобразные» волоски с тонкими стенками, состоящие из 9-12 клеток, иногда заполненных бурым содержимым; на нижней клетке волоска хорошо выражена продольная складчатость кутикулы. По краю листа и жилкам встречаются простые волоски с толстыми стенками и продольной складчатостью кутикулы, состоящие из 213 клеток. У основания таких волосков лежат несколько клеток эпидермиса, слегка приподнимающихся над поверхностью листа. Вдоль жилок проходят секреторные ходы с красновато-бурым содержимым, особенно хорошо заметные по краю листа (рис. 4).
Рис. 4. Микроскопия листа череды трехраздельной: А - эпидермис верхней стороны листа; Б - эпидермис нижней стороны листа; В - край листа: 1 - волоски; 2 - толстостенные
волоски; 3 - секреторные ходы.
Результаты спектрофотометрического определения количественного содержания дубильных веществ в сырье дуба обыкновенного представлены на рис. 5 и табл. 2.
Рис. 5. Спектры поглощения растворов в 70% спирте этиловом:
1 - водного извлечения из свежесобранного ЛРС; 2 - водного извлечения из готового ЛРС.
Таблица 2.
Спектрофотометрическое определение содержания дубильных веществ в траве череды трехраздельной проводилось на двух видах сырья: свежесобранном (дата сбора - 21. 05. 13г, сбор проводился на расстоянии 70 км от города оренбурга) и готовом ЛРС (производитель ООО «Фито-Бот», дата изготовления - 01. 02. 2011г)
Результаты спектрофотометрического определения количественного содержания дубильных веществ в сырье череды трехраздельной представлены на рис. 6 и табл. 3.
Рис. 6. Спектры поглощения растворов в 70%спирте этиловом: 1 - водного извлечения из свежесобранного ЛРС; 2 - водного извлечения из готового ЛРС.
Таким образом видно, что содержание дубильных веществ в свежесобранном и готовом ЛРС одно и того же вида растения отличаются. И хотя оба показателя отвечают требования нормативной документации (НД), в свежесобранном ЛРС содержание дубильных веществ выше. Различия в значения можно объяснить влиянием условий заготовки, сушки и хранения ЛРС, так как под влиянием различных факторов (свет, температура, влажность и тд.) происходят окисление и гидролиз дубильных веществ, что отражается на количественном содержании дубильных веществ в сырье.
Таблица 3.
ВЫВОДЫ
1. Дубильные вещества - это безазотистые неядовитые, обычно аморфные соединения, многие из них хорошо растворимы в воде и спирте, обладают сильно вяжущим вкусом. На территории Оренбургской области наиболее часто встречаются семейства растений, содержащих дубильные вещества: Буковые - Fagaceae, (дуб черешчатый - Quercus robur), Астровые-Asteraceae (череда трехраздельная - Bidens tripartita), семейства Розовые -Rosaceae обыкновенная - Padus avium), Ивовые - Salicaceae (Ива белая - Salix alba), гераниевых - Geraniaceae (герань леснаая - Geranium sylvaticum) и др.
Из вышеперечисленных растений наибольшее внимание следует уделить таким лекарственные растениям, как дуб обыкновенный (Quercus robur) и череда трехраздельная (Bidens tripartita), так как они наиболее часто встречается как в свежем виде, так и в качестве готового ЛРС.
2. Показатели содержания дубильных веществ в сырье, полученные в ходе исследования, отвечают требования НД.
3. На основании проведенного исследования можно сделать вывод, что в свежесобранном растительном сырье содержание дубильных веществ выше, чем в готовом ЛРС.
4. Различия в значения можно объяснить влиянием условий заготовки, сушки и хранения ЛРС, так как под влиянием различных факторов (свет, температура, влажность и тд.) происходят окисление и гидролиз дубильных веществ, что отражается на количественном содержании дубильных веществ в сырье.
5. Для повышения качества лечения и профилактики различных заболеваний, при которых используются ЛП, содержащие дубильные вещества, эффективнее будет использовать отвары и настои из свежесобранного сырья.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Брезгин Н. Н. Лекарственные растения Верхневолжья. - Ярославль, 1984, 224 с.
2. ГОСТ 24027. 2-80 Сырье лекартсвенное растительное. методы определения влажности, содржания золы, экстрактивных и дубильных веществ, эфирного масла 06. 03. 1980
3. Данилова Н. А., Попова ДМ. Количественное определение дубильныхвеществ в корнях щавеля конского методом спектрофотомерии в сравнении с методом перманганатометрии. Вестник ВГУ. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2004. № 2. с. 179-182. RU 2127878 C1, 20. 03. 1999.
4. Дикорастущие полезные растения России / Отв. ред. А. Л. Буданцев, Е. Е. Лесиовская. - СПб.: Издательство СПХФА, 2001. - 664 с.
5. Куркин В. А. Фармакогнозия: Учебник для студентов фармацевтических вузов. - Самара: ООО «Офорт», ГОУВПО «СамГМУ», 2004. - 1200 с.
6. Ковалев В. Н. Практикум по фармакогнозии. Учеб. пособие для студ. вузов: -М., Изд-во НФаУ; Золотые страницы, 2003. - 512 с.
7. Лекарственное растительное сырье. Фармакогнозия: Учебное пособие / Под ред. Г. П. Яковлева и К. Ф. Блиновой. - СПб.: СпецЛит, 2004. - 765 с.
8. Лекарственное сырье растительного и животного происхождения. Фармакогнозия: учеб. пособие/ Под. ред. Г. П. Яковлева. - СПб.: СпецЛит, 2006. - 845 с.
9. Материалы сайта http: //med-tutorial. ru
10. Материалы сайта http: //medencped. ru
11. Муравьева Д. А. Фармакогнозия: Учебник / Д. А. Муравьева, И. А. Самылина, Г. П. Яковлев. - М.: Медицина, 2002. - 656с.
12. Носаль М. А., Носаль И. М. Лекарственные растения в народной медицине. Москва СП «Внешиберика» 1991. -573 с.
13. Практикум по фармакогнозии: Учеб. пособие для вузов / В. Н. Ковалев, Н. В. Попова, В. С. Кисличенко и др.; Под общ. ред. В. Н. Ковалева. - Харьков: Изд-во НфаУ: Золотые страницы: МТК - Книга, 2004. - 512 с.
14. Руководство по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище. Руководство. Р 4. 1. 1672-03. - М., 2003, c. 120.
15. Соколов С. Я., Замотаев И. П. Справочник по лекарственным растениям. -М.: Просвещение, 1984.
16. Справочник пособие Н. И. Гринкевич. Лекарственные растения. -М.: Высшая школа, 1991.
Скачать диплом:
У вас нет доступа к скачиванию файлов с нашего сервера.